改善ABR功能防治动脉粥样硬化的胆碱能抗炎机制

In our previous study, it has been proved that improvement of arterial baroreflex (ABR) can prevent atherosclerosis. This study is designed to test the hypothesis that ABR plays a great role in preventing atherosclerosis via cholinergic anti-inflammatory pathway, alleviating inflammatory response and oxidative stress. Atherosclerosis model is performed in ApoE-/- mice fed with Western-type diet and used to testify the effects of sino-aortic denervation on atherosclerosis. The expression of a7nAChR and VAChT will be determined, and the correlation with inflammation/oxidative stress is to be clarified. The significance of a7nAChR will be studied in a7-/- /ApoE-/- mice. A small dose of Ketanserin is designed to improve ABR for atherosclerosis therapy. Whether the therapeutic effects depend on a7nAChR is to be studied. Peritoneal macrophages will be separated to determine the expression of a7nAChR, the release of the inflammatory factors, LDL intake and the level of reactive oxygen species so as to further demonstrate the hypothesis that improving baroreflex sensitivity as a therapeutic target for atherosclerosis depends on cholinergic anti-inflammatory pathway. A novel target can be provided for new drug development and new clinical therapy for atherosclerosis can be performed on this basis.

前期研究表明，改善动脉压力感受性反射（ABR）功能可防治动脉粥样硬化，本课题拟证实其机制是通过提高迷走神经活性，激动α7受体介导的胆碱能抗炎通路，减轻机体炎症反应和氧化应激损伤，从而发挥抗动脉粥样硬化作用。采用ApoE基因敲除小鼠用高脂饲料诱发动脉粥样硬化模型，验证去窦弓神经后动脉粥样硬化病变加重，测定α7nAChR和乙酰胆碱转运体VAChT表达水平，并分析其与炎症反应和氧化应激的关系。利用ApoE、α7nAChR双基因敲除小鼠，研究α7nAChR在ABR与动脉粥样硬化关系中的关键作用，用小剂量酮色林治疗，改善ABR功能，结合α7受体激动剂，分析酮色林的作用是否依赖a7nAChR。分离各组小鼠腹腔巨噬细胞，测定巨噬细胞α7nAChR表达，炎症因子释放、LDL摄取和过氧化物水平，从细胞水平进一步验证。本课题为防治动脉粥样硬化新型药物的开发研制以及临床诊治提供新的靶点和理论依据。

前期研究表明，改善动脉压力感受性反射（ABR）功能可防治动脉粥样硬化，本课题拟证实其机制是通过提高迷走神经活性，激动α7 受体介导的胆碱能抗炎通路，减轻机体炎症反应和氧化应激损伤，从而发挥抗动脉粥样硬化作用。采用ApoE 基因敲除小鼠用高脂饲料诱发动脉粥样硬化模型，验证去窦弓神经后动脉粥样硬化病变加重，测定α7nAChR 和乙酰胆碱转运体VAChT 表达水平，并分析其与炎症反应和氧化应激的关系。利用α7nAChR基因敲除小鼠，研究α7nAChR 在ABR 与动脉粥样硬化关系中的关键作用，用小剂量酮色林治疗，改善ABR 功能，结合α7 受体激动剂，分析酮色林的作用是否依赖a7nAChR。分离各组小鼠腹腔巨噬细胞，测定巨噬细胞α7nAChR 表达，炎症因子释放、LDL 摄取和过氧化物水平，从细胞水平进一步验证。我们证实，动脉压力感受性反射功能受损后，动脉粥样硬化加重，α7nAChR和乙酰胆碱转运体VAChT表达水平降低，炎症和氧化应激水平加重，用α7受体激动剂PNU-282987进行治疗后有明显改善，应用酮色林治疗显著改善ABR功能，在α7+/+小鼠上，可减缓动脉粥样硬化的发生发展，降低炎症和氧化应激反应，在α7-/- 小鼠上这种作用被取消。反映了ABR功能通过vagus-ACh-α7-nAChR这一通路来影响动脉粥样硬化小鼠的炎症与氧化应激，改善动脉压力感受性反射功能防治动脉粥样硬化的机制是在一定程度依赖于α7受体介导的胆碱能抗炎通路。总之，ABR功能损伤后，自主神经系统功能紊乱，神经系统对炎症反应的抑制受到影响，导致机体的炎症反应加剧，抗氧化能力降低，从而促进动脉粥样硬化的发展。而改善ABR功能，防治动脉粥样硬化的机制在一定程度上是通过提高迷走神经活性，促进α7nAChR介导的胆碱能抗炎通路，减轻机体炎症反应和氧化应激损伤，从而发挥抗动脉粥样硬化作用。本课题为防治动脉粥样硬化新型药物的开发研制以及临床诊治提供新的靶点和理论依据。