植物病毒变异的快速检测与新病毒基因组研究

利用RNA病毒系统侵染的寄主组织中能够制备获得高含量病毒基因组双链RNA和双链RNA相对稳定的特征，在纯化的双链RNA两端分别连接人工合成的DNA接头，使用互补单引物进行RT-PCR扩增，获得全长cDNA，进行基因克隆和测序，以快速获得病毒基因组的全序列并确定其末端精确结构，进而分析基因编码特征。结合病毒基因组的侵染性克隆构建和寄主生物学反应测定，确定新病毒的分类学地位和生物学特征，以及病毒变异的株系特征。进一步对新病毒和病毒变异株的发生危害进行系统研究，达到国际病毒分类与命名委员会的认定要求。本项目利用分子生物学最新进展，建立快速精确测定病毒基因组全序列的新方法，快速鉴定大量新病毒和双链RNA因子，为发现新的RNA病毒、亚病毒RNA复制因子、提高发现和控制新病毒和新病毒变异株的研究能力开创新的技术和理论条件。