贝母素乙逆转胃癌多药耐药的分子机制及应用基础研究

The peiminine is an effective ingredients separated and purified from advantage plant resources in Xinjiang-Fritillaria walujewii Regel by our group .The study found that peiminine can improve the sensitivity of gastric cancer multidrug resistance (MDR)and effectively reverse multidrug resistance characteristics,but the molecular mechanism is unclear.The project is purposed on the bacic of preliminary work ,respectively ,from the known ways and unknown ways to study the molecular mechnism .Known ways the research peiminine anti-resistance role of drug transporter function of p-gp dependent apoptosis induced caspase depentent Unknown pthway: through proteomics research platforms and CDNA microarray technology screening differdetially expressed proteins and genomes in parental cells and MDR cells and then check out the biological function and signal ing pathways to recover the new anti-resistance mechanisms, in order to lay a theoretical foundation of peiminine as a gastric cancer chemotherapy sensitizer.

贝母素乙是本项目组分离纯化的新疆优势植物资源——新疆贝母中的有效活性成份。研究发现，贝母素乙能够提高胃癌耐药细胞对化疗药物的敏感性，有效逆转胃癌多药耐药（MDR）的特性，但其分子机制尚不清楚。本项目拟在前期工作的基础上,分别从已知途径和未知途径两方面深入探讨贝母素乙逆转胃癌MDR的分子机制。已知途径：主要研究贝母素乙抗耐药作用对ATP结合盒转运蛋白家族（ATP-binding cassette，ABC）药物转运功能的依赖性和凋亡调控分子、信号通路作用的依赖性；未知途径主要通过蛋白质组学研究平台和cDNA microarray 技术，筛选贝母素乙作用于亲本细胞和胃癌MDR细胞后的差异表达蛋白和基因组，对筛选出的差异表达蛋白和基因组进行功能和信号通路的聚类生物学分析，揭示其抗耐药作用的新机制，为贝母素乙作为胃癌化疗的增敏剂奠定理论基础。

伊贝母是新疆优势药用植物资源， 贝母素乙是伊贝母中生物碱类的有效活性成份。前期研究发现，贝母素乙有效逆转胃癌多药耐药（MDR）的特性，但其分子机制尚不清楚。本项目利用人源胃癌细胞建立多药耐药裸鼠移植瘤模型，通过蛋白质组学研究平台和cDNA microarray技术，筛选贝母素乙作用于亲本细胞和胃癌MDR细胞后的差异表达蛋白和基因组，对筛选出的差异表达蛋白和基因组进行功能和信号通路的聚类生物学分析，揭示其抗耐药作用的新机制。 .结果表明贝母素乙联用奥沙利铂可明显增加化疗效果，具有协同效应。荷瘤小鼠体内实验肿瘤体积与对照组相比均具有显著性差异。本实验运用RT2 Profiler PCR Arrays筛选贝母素乙联合奥沙利铂作用于胃癌细胞的凋亡差异基因，表明贝母素乙联合奥沙利铂改变其凋亡相关信号通路从而达到化疗增敏的效果，促进胃癌细胞凋亡。建立胃癌PDX模型，联合用药组裸鼠移植瘤的体积较小。脱颈处死裸鼠后，剥离裸鼠皮下瘤称重，结果与上述现象一致。以上实验结果表明贝母素乙在体内有化疗增敏作用，可增加奥沙利铂的化疗敏感性。联合用药组瘤体组织中Ki67的表达明显低于单独用药组。Western Blot结果显示，联用贝母素乙组Cleaved-caspase3表达显著上调。.本项目利用新疆优势药用植物资源伊贝母中的有效活性成份贝母素乙进行胃癌 MDR 的干预，进一步对其分子机制进行研究。可能开发出具有自主知识产权的新型药物，同时提高对新疆药用植物的开发利用，具有重大的理论和临床应用价值。