肿瘤相关巨噬细胞TAM通过miR-9/MALAT1/TGF-β通路介导肝癌转移的分子机制研究

Tumor-associated macrophage(TAM) palys an important role in the development of hepatocellular carcinoma, yet its role in HCC metastasis remains uncertain. Our preliminary studies suggest that TAM and miR-9 methylation implicated the progression of HCC metastasis. Based on our preliminary data, we hypothesized that miR-9 is silenced by aberrant promoter methylation in TAM cocultured with HCC cells, then down-regulated the expression of MALAT1 by directly target the 3´-untranslated region. MALAT1 up-regulated the expression of TGF-β and also regulated by TGF-β,then promoted metastasis of HCC cells by aberrant activating TGF-βsignaling pathway. In this application, by in vitro and in vivo experiments, we plan to validate the expression of miR-9、MALAT1 and TGF-βin TAM and analyze the correlation with HCC metastasis. We also investigate how TAM promoted metastasis of HCC cells, particularly the mechanism involving the miR-9/MALAT1/TGF-β pathway. The outcome will help to identify molecular mechanism of HCC metastasis, and therapeutic targets for drug discovery against HCC.

肿瘤相关巨噬细胞TAM在HCC发生发展中起着重要作用，但其在HCC转移中的作用及机制尚未阐明。我们前期研究发现，TAM中miR-9的甲基化失活参与了TAM介导的HCC转移。结合相关文献推测，TAM中miR-9因甲基化失活致使其靶基因MALAT1调控的TGF-β激活，激活的TGF-β也会诱导MALAT1的表达，促使TAM内TGF-β不断被激活并大量释放，导致肝癌细胞内TGF-β通路及下游相关蛋白的表达参与HCC转移。为证实此假设，我们将分析临床肝癌标本中TAM分布及miR-9、MALAT1、TGF-β的表达与HCC转移的相关性；采用体外TAM和肝癌细胞的共培养，探析miR-9/MALAT1/TGF-β通路对HCC转移的作用及机制；通过肝癌动物模型，证实TAM中miR-9对HCC转移的作用及机制。本课题将有助于深入了解HCC转移的机制，为探索更有效的生物靶向治疗提供新的依据。

肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，我国肝癌新发病率居所有癌症第5位，死亡率居第2位。手术切除虽然是治疗肝癌最有效的手段之一，但即使是根治性切除，术后5年复发率仍高达60～70%，术后复发转移是影响肝癌远期疗效的重要因素。研究发现，肿瘤相关巨噬细胞TAM在肝癌发生发展中起着重要作用，但其在肝癌转移中的作用及机制尚未阐明。本研究通过检测临床肝癌标本中miR-9、MALAT1的表达并分析其与肝癌转移的相关性；采用体外TAM和肝癌细胞的共培养，观察miR-9对肝癌细胞侵袭、迁移的作用及机制；通过建立肝癌动物模型，进一步证实miR-9对肝癌转移的作用及机制。研究结果表明，miR-9在肝癌组织中低表达，MALAT1在肝癌组织及肝癌细胞中高表达，且与患者预后具有相关性；miR-9可以抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭，深入研究发现miR-9通过靶向MALAT1调控TGF-β信号通路影响肝癌细胞转移的机制；肝癌动物模型进一步证实miR-9抑制肝癌生长及转移的作用。本项目研究将为探索更有效的生物靶向治疗提供新的依据，可能对临床治疗肝癌有一定的临床意义。