以IGF2/IGF1R与SYT/SSX1为靶点治疗滑膜肉瘤的实验研究

滑膜肉瘤是较常见的软组织恶性肿瘤，对化疗不敏感,10 年生存率仅为20%。多数患者最终死于远隔转移。其因此临床上迫切需要针对滑膜肉瘤的分子靶向治疗,以改善生存率。滑膜肉瘤拥有的特异性融合基因SYT-SSX是潜在的分子靶向治疗靶点。然而，我们发现单纯敲除SYT-SSX无法使已经长成的肿瘤包块消失。这是因为多数实体瘤都是多靶点多环节调控的。因而靶向治疗药物联合应用已经成为了目前的发展方向。研究发现滑膜肉瘤中IGF2高表达，后者通过IGF1R在肿瘤形成及对抗失巢凋亡的过程中起关键作用。为此我们设计了本研究，同时抑制IGF2/IGF1R与SYT-SSX1癌基因两个靶点，并通过在预实验中已经成功建立的滑膜肉瘤肺转移裸鼠模型观察双靶点抑制对滑膜肉瘤细胞转移特性的影响。这对于指导临床应用靶向药物治疗滑膜肉瘤转移，进一步阐明SYT-SSX1和IGF2/IGF1R在滑膜肉瘤发生、发展中的作用具有重要意义。

滑膜肉瘤是较常见的软组织恶性肿瘤，10 年生存率仅为20%。多数患者最终死于远隔转移。滑膜肉瘤拥有的特异性融合基因SYT-SSX 是潜在的分子靶向治疗靶点。然而，我们发现单纯敲除SYT-SSX 无法使已经长成的肿瘤包块消失。这是因为多数实体瘤都是多靶点多环节调控的。因而靶向治疗药物联合应用已经成为了目前的发展方向。研究发现滑膜肉瘤中IGF2 高表达，后者通过IGF1R 在肿瘤形成及对抗失巢凋亡的过程中起关键作用。为此我们同时抑制IGF2/IGF1R 与SYT-SSX1 癌基因两个靶点，观察双靶点抑制对滑膜肉瘤细胞转移特性的影响。试验中我们成功阻断IGF2/IGF1R的表达，系统观察Igf2表达水平的变化对细胞增殖、细胞周期，克隆形成能力、细胞侵袭能力。制备了高成瘤率的裸鼠滑膜肉瘤细胞系HS-SYN-II肺转移模型及皮下成瘤模型。应用质粒构建及细胞转染的方法敲除HS-SYN-II 细胞系SYT-SSX1融合基因或在HEK 293T 细胞中高表达SYT-SSX1融合基因。试验发现，IGF1R与SYT-SSX1的双靶点阻断对细胞增殖、细胞周期，克隆形成能力（平板克隆形成实验）影响与阻断单独靶点（IGF1R和SYT-SSX1）差别不大。究其原因，可能由于二者可能在同一传导通路的上下游。数据表明，PI3K/AKT信号通路可能在SYT-SSX1介导的细胞侵袭中起着关键作用。应用HS-SY-II-shSYT-SSX1和HS-SY-II-SCR细胞作体内试验，皮下成瘤试验和尾静脉注射瘤细胞肺部成瘤试验说明SYT-SSX1对于滑膜肉瘤细胞的生长和转移具有促进作用。实验中阻断IGF2/IGF1R后，显微镜下观察到了细胞骨架变化。