新的鼻咽癌候选肿瘤抑制基因Myocardin的功能及其抑癌分子机制的研究

我们的前期研究发现鼻咽癌组织及细胞中存在Myocardin转录表达下调/缺失，且其直接原因之一为Myocardin基因启动子区DNA甲基化，但其转录失活是否存在其它机制及其在NPC发病中的作用仍不清楚。为此，本研究首先分析NPC中Myocardin表达缺失/下调与等位基因丢失、基因突变的关系；然后采用基因克隆转染技术和siRNA 技术分别建立表达Myocardin的鼻咽癌细胞系和Myocardin沉默的正常鼻咽上皮细胞系，通过一系列功能实验分析Myocardin表达上调对鼻咽癌细胞的恶性生物学行为的影响以及其表达缺失对正常鼻咽上皮细胞的恶性转化作用，以及Myocardin对肿瘤相关信号通路活性的影响。项目研究结果不仅有助于揭示Myocardin在鼻咽癌中转录失活的原因、阐明该基因的部分肿瘤生物学功能及其对鼻咽癌细胞潜在抑瘤作用可能的分子机制，还可以为鼻咽癌诊治提供新的分子标志物和治疗靶标。

我们的前期研究发现鼻咽癌组织及细胞中存在Myocardin转录表达下调，且其原因之一为Myocardin基因启动子区DNA甲基化，但其转录失活是否存在其它机制及其在NPC发病中的作用仍不清楚。本研究通过LOH分析发现NPC中Myocardin的表达下调与染色体杂合性缺失无关。通过一系列肿瘤生物学实验，我们发现Mycardin在体外可抑制鼻咽癌细胞的增殖和克隆形成能力，但无法抑制肿瘤细胞迁移运动。动物实验结果显示Myocardin基因对鼻咽癌细胞的抑癌作用在体内并不明显。我们进一步用Cancer PCR Array探索了Myocardin对肿瘤相关信号通路活性的影响，提示Myocardin基因的抑癌作用并不依赖主要的肿瘤相关信号通路，体外观察到的抑癌作用可能为间接作用。通过免疫组织化学分析，我们发现鼻咽癌组织中Myocardin蛋白表达水平与患者生存无关，但可作为鼻咽癌放疗后复发的独立风险因素。