鹿茸归经靶向调控早期骨关节炎TGF-β/Smads信号转导通路机制研究

关节软骨的损害在退行性骨关节炎发病过程中起重要作用。我们前期研究显示关节软骨及软骨下骨病变是OA直接发病因素，补肾活血法能阻滞或延缓关节软骨退变。最新研究表明，Smads转导的TGF-β家族信号可通过多种途径对软骨细胞的增殖、分化和成熟进行精确调控，但阐明依赖Smads转导的TGF-β家族信号在OA早期如何调控软骨形成及发育的相关机制还不明确，特别是应用中药归经靶向作用在该过程所起的调控作用尚未探索。本项目通过研究（1）用环核苷酸检测法探讨鹿茸在早期OA中的归经靶向作用。（2）单味鹿茸与TGF-β/Smads信号转导通路在OA早期软骨细胞中的关联性。（3）TGF-β/Smads信号转导通路在OA早期对关节软骨细胞增值、分化的调控，来揭示中药归经靶向理论如何通过TGF-β/Smads信号转导通路在早期OA的治疗中的作用机制。本研究依据中医"治未病"的理论为早期OA的治疗找到新的治疗靶点。

骨关节炎病变主要以关节软骨的退行性变和继发性骨质增生为主，既往研究发现，补肾中药能阻滞或延缓关节软骨退变，且Smads转导的TGF-βs信号可通过多种途径对软骨细胞的增殖、分化和成熟进行精确调控，为阐明鹿茸归经靶向通过TGF-βs/Smads信号转导通路调控软骨细胞的机制，我们按预定目标完成了相关实验工作，主要包括以下几部分内容：（1）成功建立SD大鼠骨性关节炎模型，通过病理学观察，确定了造模的成功。（2）完成ELISA法检测cAMP和cGMP在大鼠软骨中的表达。（3）完成了免疫组织化学法检测相关蛋白的表达。⑷成功的提取了高纯度的软骨总RNA，已完成荧光定量PCR对TGF-β1mRNA、TGF-βRImRNA、TGF-βRIImRNA、smad2mRNA、smad3mRNA、smad4mRNA表达的检测，⑸已完成western blotting检测蛋白的表达，通过对实验数据的分析，我们得出以下结论：（1）鹿茸通过归经靶向作用于软骨细胞膜上的TGF-β受体, 引起软骨靶器官组织受体的表达上调，促进了TGF-β信号通路的转导而起到修复软骨的作用。（2）鹿茸通过提高TGF-β1的表达量，促进其信号向核内的转导，提高了软骨的修复能力。（3）鹿茸在调控软骨的分化和增殖过程中，Smad转导的信号并不是唯一的，可能存在其他信号的交叉转导，但Smad4在TGF-β信号通路中起到关键性的作用。