黔产显齿蛇葡萄的神经保护作用物质基础及机制研究

老年性痴呆是危害人类健康的重要疾病之一,其发病机理复杂，治疗药物及方法也是多种多样的，至今仍未有理想的治疗药物。在老年性痴呆中，Aβ是老年斑的主要成分，也是AD的病理特征之一；Aβ的产生机制以及神经毒性等一直是AD的研究热点。本课题以从贵州特色资源植物显齿蛇葡萄中寻找新的神经保护剂为目的，开展如下研究:1)在Aβ聚集抑制活性及Aβ诱导的PC-12细胞毒的保护作用指导下，采用现代分离纯化手段对显齿蛇葡萄的部位进行分离纯化,获得单体化合物；2)通过波谱学手段确证单体化合物的结构，并对单体化合物进行的活性跟踪评价及作用机理研究；3)活性单体或活性部位提取工艺及质量标准研究.本研究有助于阐明显齿蛇葡萄的神经保护作用物质基础及作用机理，为进一步研究治疗老年痴呆药物提供参考,也为显齿蛇葡萄其它药理活性的研究奠定物质基础。

项目以Aβ淀粉样蛋白为活性模型，研究黔产显齿蛇葡萄中的神经保护活性物质及作用机理。通过系统研究从显齿蛇葡萄中共分离化合物18个，已鉴定出其中14个。明确了杨梅素及二氢杨梅素是该药用植物具有神经保护作用的活性化合物，在1×10-4mol/L浓度下，杨梅素、二氢杨梅素、花旗松素、山奈酚、橙皮素、芦丁、山奈酚-3-O-葡萄糖苷、异槲皮苷对Aβ25-35损伤的抑制率分别为35.31±19.50%，29.68±12.17%，38.50±3.63%，100.00±25.40%，27.66±5.40%，40.25±18.24%，40.26±25.87%和48.12±16.68%；对照品多奈哌齐的抑制率为56.94±3.97%。项目开展了杨梅素、二氢杨梅素的结构修饰研究，得到脂溶性衍生物8个，包括不同乙酰化产物6个，甲基化产物2个；这些衍生物的神经保护活性也进行了进一步评价，在1×10-4mol/L浓度下，3,3',4',5'-四乙酰基二氢杨梅素, 3,3',4',5',7-五乙酰基二氢杨梅素, 六乙酰二氢杨梅素, 3,3',4',5'-四乙酰基杨梅素, 3,3',4',5',7-五乙酰基杨梅素, 六乙酰杨梅素对Aβ25-35损伤的抑制率分别为53.05±9.06%, 45.63±8.72%，22.77±5.52%，17.53±3.31%， 75.31±5.42%和61.16±3.60%。优化了显齿蛇葡萄中活性成分二氢杨梅素的高效提取工艺；开展富含二氢杨梅素显齿蛇葡萄资源普查，获得八个省、市、自治区不同来源显齿蛇葡萄样品165份，并测定了其二氢杨梅素含量，明确了贵州梵净山及江西黎川为优质显齿蛇葡萄产地；通过本项目实施，发表论文10篇，其中SCI收录1篇，申报专利1项，培养研究生3名。