TIPE2在子宫腺肌症发病机制中的作用研究

Adenomyosis is a common benign disorder in women of reproductive age, but it has some malignant biological behaviours similar to cancers. The migration and invasion of endometrial cells play a conclusive role in the occurrence and development of adenomyosis. Some genes controlling the migration and invasion behaviours of tumor cells can also regulate the migration and invasion capacity of endometrial cells. TIPE2, a novel negative regulator, plays an anti-neoplastic role through inhibiting tumor cell migration and invasion. We previously found that TIPE2 was highly expressed in the cytoplasm of normal endometrial glandular epithelial cells, but reduced or lost in the eutopic and ectopic endometrium of women with adenomyosis, which suggesting that TIPE2 might participate in the occurrence of adenomyosis. We put forward a hypothesis that TIPE2 could be a key regulator maintaining the homeostasis of the endometrial cells and it could suppress the occurrence of adenomyosis through inhibiting the migration and invasion of endometrial cells. This project aims to determine the suppressive role of TIPE2 in the development and progression of adenomyosis and clarify the mechanism of TIPE2 inhibiting adenomyosis using clinical samples test, in vitro cell model and in vivo animal models. Meanwhile, it lays the foundation for revealing the pathogenesis of adenomyosis and exploring new methods for prevention, diagnosis and treatment of this disease.

子宫腺肌症为育龄女性常见良性疾病，却具有某些恶性肿瘤的生物学行为。子宫内膜细胞的迁移、侵袭在子宫腺肌症的发生发展中发挥决定性作用，某些调控肿瘤细胞迁移、侵袭的基因同样可以调节子宫内膜细胞的迁移与侵袭。新型免疫负调控蛋白TIPE2可通过抑制肿瘤细胞迁移和侵袭的能力从而发挥抗肿瘤作用。申请者在前期研究发现：TIPE2可高表达于正常子宫内膜腺上皮细胞的胞浆中，而在子宫腺肌症患者的在位及异位子宫内膜中TIPE2的表达明显下调或缺失，提示TIPE2很大可能参与了子宫腺肌症的发生。故提出假说：TIPE2可能是子宫内膜细胞自身稳定的关键调控因子，能通过抑制子宫内膜细胞的迁移和侵袭，抑制子宫腺肌症的发生。本课题拟利用临床标本检测、体外细胞模型、体内动物模型，明确TIPE2 在子宫腺肌症发生发展中所产生的抑制作用，并阐明其作用机制，为全面揭示子宫腺肌症的发病机制和探寻对此病预防、诊断和治疗的新方法奠定基础。

子宫腺肌症是一种良性疾病，却具有某些恶性肿瘤的生物学行为。TIPE2在多种恶性肿瘤中存在低表达或缺失的现象，并与肿瘤进展密切相关。为探讨TIPE2在子宫腺肌症中的作用，我们采用qRT-PCR、Western blot和免疫组化检测子宫腺肌症患者在位和异位内膜组织以及对照组子宫内膜中TIPE2 mRNA和蛋白水平的表达。采用CCK-8、克隆形成和Transwell实验检测TIPE2过表达和干扰后对子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。运用Western blot检测细胞上皮间质转化（EMT）相关标志物和信号分子的表达。运用co-IP法检测TIPE2与β-catenin的相互作用。采用Western blot、Transwell实验检测TIPE2对雌激素诱导的EMT和迁移、侵袭能力的影响。最后，分离培养子宫腺肌症患者的原代子宫内膜细胞，使用qRT-PCR、Western blot、Transwell等实验进一步在原代子宫内膜细胞中验证TIPE2的作用。结果证实：TIPE2在子宫腺肌症患者在位和异位内膜组织中的表达较对照组明显下调；TIPE2对子宫内膜细胞的增殖和克隆形成能力无明显影响；TIPE2可逆转雌激素诱导的子宫内膜细胞的EMT；TIPE2可通过靶向β-catenin核移位抑制子宫内膜细胞的EMT，从而抑制子宫内膜细胞的迁移和侵袭；TIPE2可能通过NF-κB/MMP2信号通路抑制子宫内膜细胞的迁移及侵袭。上述结果提示：TIPE2参与了子宫腺肌症的发展进程，TIPE2可通过靶向β-catenin阻止其核移位抑制子宫内膜细胞发生EMT，从而进一步抑制子宫内膜细胞的迁移和侵袭。此外，在本项目的资助下，我们还进行了PDCD4通过抑制自噬及靶向NF-κB/MMP2/MMP9信号通路抑制子宫内膜细胞的增殖、迁移和侵袭的研究；雌孕激素调控子宫内膜癌细胞中PDCD4表达的机制研究；成熟形式的IL-37（IL-37bΔ1-45）在子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用和机制研究；TRIM27调控卵巢癌及子宫内膜癌细胞中PDCD4表达的机制研究；TIPE2在卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用和机制研究。在2018/1-2021/12，我们在Biol Reprod, Oncol Rep, Hum Reprod, Lab Invest杂志上发表4篇SCI收录论文。