Rab33a促进B细胞自噬参与系统性红斑狼疮发病机制的研究

During the development of systemic lupus erythematosus(SLE), autoreactive B cells are activated by increased autoantigen exposure, leading to autoantibody overproduction and chronic inflammation. Current studies have demonstrated that autophagy plays an important role in regulating B cell function. Our pilot studies found that Rab33a, which is involved in membrane trafficking on autophagosomes or in the Golgi body, promoted autophagy in B cells. We also detected increased Rab33a expression and enhanced autophagy in B cells from SLE patients. Based on these findings, we hypothesize that Rab33a may promote B cell autophagy and contribute to the pathogenesis of SLE. In this study, we will elucidate the molecular mechanisms underlying Rab33a-mediated autophagy in B cells and its effects on B cell activation, differentiation and function. By generating B cell specific Rab33a gene knockout mice for lupus induction, we will investigate whether and how Rab33a promotes autophage in B cells and contributes to disease progression in lupus mice. Furthermore, we will examine the role of Rab33a in promoting B cell autophage and modulating B cell functions in SLE patients. Together, our proposed studies will provide new insight in understanding the function of Rab33a in autoimmune progression and may facilitate the development of novel therapeutic strategy for treating SLE.

系统性红斑狼疮（SLE）病人体内自身抗原反复暴露，激活自身反应性B细胞并分泌大量自身抗体，是导致炎症持续存在和慢性化的主要病理机制。现已证实自噬是调节B细胞功能的重要机制。课题组的前期研究发现，调节自噬吞噬体和高尔基体囊泡融合和转运的重要分子-Rab33a促进了B细胞自噬，并且初步证实SLE病人的B细胞中Rab33a表达增高，自噬增加，提示Rab33a可能通过促进B细胞自噬，参与了SLE的发病和炎症进展。为证实这一假说，我们拟开展如下研究：以B细胞特异性敲除Rab33a基因小鼠为模型，分析Rab33a调控B细胞自噬和功能的具体环节及其分子机制；以降植烷诱导的狼疮小鼠模型和SLE病人为研究对象，探讨Rab33a促进B细胞自噬对B细胞的活化和分化的影响，及其在SLE发病中的重要作用。本研究的完成有助于深入理解SLE的发病机制，并为SLE的治疗策略提供了新的线索。

系统性红斑狼疮（SLE）病人体内自身抗原反复暴露，激活自身反应性B细胞并分泌大量自身抗体，是导致炎症持续存在和慢性化的主要病理机制。现已证实自噬是调节B细胞功能的重要机制。本研究中，我们首先研究了Rab33a对B细胞自噬的影响，发现Rab33 与LC3 在B 细胞中存在共定位：LPS刺激B 细胞后Rab33 与LC3 的表达均上调，并出现共聚；抑制Rab33a 的表达后，LC3-I的表达也降低，激光共聚焦检测现LC3-I 的招募减少，提示Rab33a 诱导了LC3-I 的表达和招募；进一步研究证实，在高滴度ds-DNA的SLE病人外周血CD19+B细胞中，Rab33a的表达增高；CD19+B细胞中 LC3 斑点与ds-DNA的水平呈正相关。在SLE病人中致病性B细胞亚群的研究中发现，TRL4+CXCR4+浆细胞在SLE病人和狼疮小鼠模型的外周血和肾脏组织的数量显著增加，肾脏中浸润的TRL4+CXCR4+浆细胞数量与狼疮肾炎分级和SLEDAI评分呈正相关，与病人的疾病活动评分、DS-DNA和尿蛋白定量呈正相关，并分泌大量的DS-DNA，应用TRL4抑制剂后，小鼠循环中的DS-DNA减少，肾脏损害减轻，提示TRL4+CXCR4+浆细胞是直接参与SLE发病和狼疮肾炎进展的关键B细胞亚群。SLE病人循环中的DN记忆型B细胞与SLE的疾病活动性呈正相关，Tph细胞数量与DN B细胞数量呈负相关，提示可能存在DN B细胞在Tph细胞的辅助下转化为浆细胞的过程。本研究的完成有助于深入理 解SLE的发病机制，并为SLE的治疗策略提供了新的线索。