新型昆虫肌肉毒剂作用机理的研究

昆虫肌细胞钙通道是杀虫剂潜在的作用靶标，但迄今尚未有作用于这一靶标的商品化杀虫剂问世。前期研究结果提示，新型天然化合物苦皮藤素Ⅳ等可能作用于昆虫的肌肉系统，受体偶联的钙通道可能是这类化合物作用的靶标。本项申请拟制备苦皮藤素Ⅳ的单克隆抗体，结合采用免疫荧光技术、免疫酶技术、免疫胶体金技术及免疫印迹技术定位苦皮藤素Ⅳ在昆虫肌细胞上的作用受体；采用Ca2+指示剂直接测定技术及激光扫描共聚焦电镜技术结合新型荧光探针进行肌细胞中Ca2+释放动力学分析；采用"功能表达克隆技术"分离苦皮藤素Ⅳ受体蛋白的编码基因，克隆表达受体蛋白，并将这种蛋白转染293细胞，以此建立昆虫肌肉毒剂的筛选模型。.本项申请的科学意义在于：将在国内外首次从分子水平研究苦皮藤素Ⅳ在昆虫肌细胞中的受体，阐明其作用机理，建立一种新颖的杀虫剂高通量筛选模型，为一类以Ca2+通道为作用靶标的新型杀虫剂-昆虫肌肉毒剂的创制奠定基础。