miR-143靶向调控TSHR基因促进甲状腺相关性眼病发病的机制研究

甲状腺相关眼病（TAO）是一种重要致盲性自身免疫性眼眶疾病，促甲状腺激素受体（TSHR）是启动其免疫反应的关键抗原。本课题组前期研究表明，TAO患者眼眶成纤维细胞（OF）中存在数十种显著表达差异miRNA。其中，表达下调的miR-143与TSHR的3'TUR区序列能够互补结合，且miR-143起始密码子上游序列存在转录子n-Mye可能结合位点。本研究推测miR-143可能通过靶向调控TSHR基因促进TAO发病，拟进一步明确OF中miR-143和TSHR表达水平与TAO病情及预后的相关性；采用分子生物学技术验证miR-143靶向调控TSHR的作用和机制；进而探讨n-Myc调控miR-143信号通路的作用和机制；并利用定向转染结合TSHR基因敲除技术，探讨miR-143-TSHR信号通路促进眼眶结缔组织病变的致病效应，从而为进一步阐明TAO的发病机制及寻找新的治疗靶点提供理论依据和实验基础。

甲状腺相关眼病（TAO）是一种致盲的器官特异性自身免疫疾病，因发病机制尚不清楚，使其治疗策略探索受到严重限制，目前国内外治治疗有效率均低于70%，愈率不足10%。眼眶成纤维细胞（orbital fibroblasts, OFs）是TAO患者自身免疫发病过程中重要的靶细胞和效应细胞，甲状腺激素受体（TSHR）是启动其免疫反应的关键抗原。本课题组利用质谱技术研究发现，TAO患者OFs中存在数十种显著表达差异的miRNA，其中表达下调的miR-143与TSHR的3’TUR区序列能够互补结合，且miR-143上游存在转录因子n-Mye可能的结合位点。遂通过人群验证明确miR-143和TSHR表达水平与TAO病情及预后的相关性，并采用分子生物学技术验证TAO患者OF中miR-143靶向调控TSHR的作用，以及n-Myc的调控miR-143信号通路的机制。进而，证实miR-143基因敲除(miR-143-/+)C56BL/6N小鼠OFs细胞TSHR及外周血TSHR抗体水平升高，而IGF-1R腺相关病毒载体转染miR-143+/-C57BL/6N小鼠可观察到眼眶组织增生水肿和大量T淋巴细胞浸润等病理改变，证实了IGF-1R协同miR-143/TSHR信号通路诱导小鼠TAO样病变的作用和机制。上述研究成果的取得将有望为进一步阐明TAO发病机制提供新的思路，为将来建立成熟的TAO动物模型，深入探讨TAO的治疗新靶点打下坚实的实验基础，对实现提高TAO的疗效、改善患者的生活质量具有重要意义。