EGFR的岩藻糖基化修饰调控p38MAPK信号转导通路抑制卵巢癌细胞自噬的机制研究

岩藻糖基化抗原是肿瘤相关糖抗原，在肿瘤早期筛查及生物学治疗方面具有重要的作用及广泛的应用前景。申请者前期工作证明：α1,2-岩藻糖转移酶基因转染使卵巢癌细胞系岩藻糖基化抗原表达改变的同时，EGFR上岩藻糖基化抗原的相对含量显著增加。该变化通过信号转导通路加快细胞增殖；通过 p38MAPK信号通路抑制细胞凋亡，使自噬基因表达下调。自噬是细胞利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程，抑制自噬可以促进肿瘤的发生、发展，EGFR和p38MAPK信号转导通路均能调节细胞的自噬行为。在前期研究的基础上我们推测岩藻糖基化抗原能够调控细胞自噬。本课题旨在探讨EGFR上岩藻糖基化修饰调节p38MAPK信号转导通路调控肿瘤细胞自噬的机制，证明岩藻糖基化抗原作为EGFR结构上的一部分通过p38MAPK信号转导通路影响自噬相关蛋白表达及活性，调控细胞的自噬行为，最终促进卵巢癌发生、发展。

岩藻糖基化抗原是一种肿瘤相关抗原，在肿瘤早期的检测及生物学治疗方面具有广泛的前景。申请者前期工作证明：卵巢癌细胞高表达α1,2-岩藻糖转移酶基因使EGFR上岩藻糖基化抗原的相对含量显著增加；主要通过PI3K信号通路加快细胞增殖；主要通过 p38MAPK信号通路抑制细胞凋亡。有研究显示EGFR和p38MAPK信号转导通路均能调节细胞的自噬行为。自噬是细胞利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程，抑制自噬或凋亡可以促进肿瘤的发生。因此我们推测岩藻糖基化抗原能够调控细胞自噬。本研究拟运用免疫组织化学、生物化学、分子生物学等研究方法在临床标本及多种卵巢癌细胞系中探讨EGFR及其他细胞表面受体分子上岩藻糖基化修饰通过p38MAPK等多种信号转导通路调控细胞自噬等生物学行为的机制，结果证明：Lewis y抗原作为EGFR、TGF-β受体、HE4、ANXA2结构上的一部分，通过调控p38MAPK、Smad2/3、ERK/MAPK等多种信号通路网络不但调控自噬、增殖、凋亡耐药、侵袭转移等相关蛋白（如自噬因子Beclin 1）的表达及活性，影响卵巢癌细胞的生物学行为，还影响AP-1的表达及活性，进一步调控Fut1的活性及α1,2-FT基因转录，导致Lewis y抗原的高表达，最终促进卵巢癌的发生发展。为寻找卵巢癌治疗靶点提供实验依据。