术后谵妄与五羟色胺代谢通路基因多态性的关联分析

术后谵妄是临床常见、安全隐患大且处理棘手的术后并发症，其产生机制尚未明了。但最新国外研究报道，谵妄与多巴胺（DA）代谢酶、转运体的基因多态性相关；而临床使用DA受体阻断剂仅能部分减轻而未能彻底消除术后谵妄。本课题组采用大鼠谵妄模型，通过微透析发现中枢核团内五羟色胺（5-HT）及其代谢产物较DA有更为显著的变化；比较5-HT重摄取抑制剂及DA拮抗剂的抗谵妄作用，发现前者能完全反转大鼠谵妄症状；将其用于手术患者，较DA拮抗剂及阿片类镇痛药能更有效预防谵妄。因此，我们推测除DA外，5-HT合成代谢通路相关位点的基因多态性可能也是引起术后谵妄的原因之一。本研究拟检测术后谵妄人群5-HT合成代谢通路的基因多态性，以寻求与术后谵妄相关的SNP位点。这将深化对术后谵妄发生机制的理解，并为术后谵妄的预防及治疗提供重要理论依据。

谵妄(delirium)是一种急性且广泛的认知障碍急性神经精神综合征。术后谵妄（Postoperative delirium,POD）不仅会增加术后并发症及医疗费用、延长住院时间，增加远、近期死亡率；还会导致患者术后长期认知功能减退，一项meta分析提示发生术后谵妄者再住院几率和死亡风险可翻倍，且发生痴呆的风险增加10倍。但由于术后谵妄的机制至今不明，该领域研究已经引起临床医师的高度重视。.本课题组采用给予大鼠腹腔注射抗胆碱药物东莨菪碱，通过行为学检测确定大鼠出现显著的谵妄行为，成功制备了谵妄动物模型。采用微透析结合HPLC法检测大鼠脑脊液及海马脑区及杏仁核脑区单胺类神经递质的含量，发现单胺类递质的浓度在谵妄模型大鼠的脑脊液中均显著增加；而五羟色胺（5-HT）含量在海马脑区和杏仁核脑区的增长的幅度最为明显，提示5-HT神经递质系统在谵妄形成中可能发挥了更为重要的作用。接着，我们采用分子生物学方法，对大鼠多个脑区的5-HT受体SR-1A的m RNA和蛋白水平进行检测，结果显示，海马和杏仁核这两个脑区的SR-1A在谵妄形成的过程中发挥重要作用。进而，我们采用脑立体定位技术，将SR-1A拮抗剂WAY100635注射至谵妄模型大鼠海马体的末端靠近杏仁核的区域，对海马和杏仁核两个脑区的SR-1A受体同时进行干预，发现SR-1A拮抗剂WAY100635显著改善了大鼠的谵妄表现。这些结果提示海马和杏仁核脑区的5-HT及SR-1A受体系统在谵妄形成中发挥了重要作用。.之后本课题组又深入探讨炎性介质白细胞介素-1β（IL-1β)及其相关信号通路是否参与调节5-HT及SR-1A受体系统对谵妄的形成，结果发现：.1，谵妄模型大鼠的脑脊液IL-1β水平显著升高，谵妄模型大鼠海马脑区给予SR-1A拮抗剂WAY100635后脑脊液IL-1β水平显著下降，提示致炎因子IL-1β参与5-HT及SR-1A受体系统对谵妄形成的调节。.2，谵妄模型大鼠海马脑区给予SR-1A拮抗剂WAY100635后海马与杏仁核脑区NLRP3表达水平显著下降，与脑脊液中致炎因子IL-1β的变化相一致，提示WAY100635可能通过下调NLRP3参与了对IL-1β释放的调节。NLRP3是目前研究得最清楚的NOD样受体（NLRs）家族成员之一,它与接头蛋白-凋亡相关微粒样蛋白（apoptosis-associated spe