血瘀质非创伤性股骨头坏死FATP-1相关信号通路水平及活血化瘀方调体干预机制研究

Nontraumatic osteonecrosis (NONFH) is a complex disease with multiple pathogenic factors and multiple regulations of signal pathways. Its pathogenesis involves different theory. TCM constitutional element plays an important role in the formation, development and prognosis of NONFH and stagnant blood constitution is one of the highest rates of NONFH. Fat metabolism disorder theory is an important theory of NONFH, and fat metabolism disorders which caused intravascular fat embolism, coagulopathy and endothelial cell injury is an important disease factors. From the level of molecular biology, fat metabolism disorder induced vascular lesions related FATP-1/CPI-17, FATP-1/ROS and FATP-1/PAI-l signal pathways for starting to discuss the correlation of the theory of fat metabolism disorders and NONFH with blood stasis mass. To explore the mechanism how activating and stasis-removing Chinese herbal drugs effects the FATP-1/CPI-17, FATP-1/ ROS and FATP-1/PAI-l signal pathways, and to analyze the ways and mechanism of regulating constitution of NONFH with blood stasis mass. The study results will provide a new ideas and approaches for prevention and cure of NONFH.

非创伤性股骨头坏死(NONFH)是多因素致病、多信号通路调节的复杂疾病，其发病机理涉及多个理论学说。前期自然基金项目研究表明，中医体质因素在NONFH的形成、发展和转归中发挥重要作用，血瘀质是NONFH的高发体质。脂代谢紊乱引起的血管内脂肪栓塞、凝血异常及血管内皮细胞的损伤是NONFH的重要发病因素。本项目拟进一步从分子生物学水平以脂代谢紊乱致血管病变相关FATP-1/CPI-17，FATP-1/ROS及FATP-1/PAI-l信号通路为切入点，探讨脂代谢紊乱与血瘀质NONFH的相关性，揭示其在血瘀质NONFH发病中的作用；并深入研究临床应用50余年的西部地产中药制剂--活血化瘀方（陇中损伤散）对FATP-1—CPI-17/ROS/PAI-l信号通路表达水平的影响，结合中医“体质可调”理论分析活血化瘀方调体干预该病的分子机制，为NONFH的早期中医药干预策略及防治模式提供新的思路与方法

项目背景：脂质代谢紊乱是其重要发病机制之一，酒精、激素会不同程度的致使脂质代谢的异常，而FATP-1/CPI-17，FATP-1/ROS及FATP-1/PAI-l信号通路与脂质代谢密切相关，故本项目以此为背景来探讨该信号通路与NONFH脂代谢的相关机制。.研究内容：1.通过在文献检索数据库中查阅NONFH发病机制、中医体质、FATP-1/CPI-17，FATP-1/ROS及FATP-1/PAI-l信号通路、脂质代谢相关的文献，探讨其研究现状及在NONFH中的相互关系；2.收集2016年01月-2019月在甘肃省中医院骨科就诊符合纳入标准的NONFH患者并进行中医体质类型判定，并对纳入研究的患者进行活血化瘀方干预研究、观察其临床疗效；3.应用q-PCR进行FATP-1/CPI-17，FATP-1/ROS及FATP-1/PAI-l脂质代谢相关基因的检测，应用Western-blot检测FATP-1等对应蛋白的表达量；4.对NONFH进行免疫组化检测。.重要结果、关键数据：1.共调查NONFH患者296例，单一体质病例中以血瘀质(占28.04%)、气虚质(占18.58%)、痰湿质(占12.50%)所占比例较高，以血瘀质为最高。通过对114例NONFH患者应用陇中损伤胶囊调体干预研究发现治疗3个月及随访6个月后观察发现，“活血化瘀”方对NONFH的治疗具有促进血液循环，起到治疗股骨头坏死的作用。2.RT-PCR检测结果表明FATP-1在血瘀组与平和组比较差异有统计学意义（P<0.05）；CPI-17基因在血瘀组与平和组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；PAI-1在血瘀组与平和组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；3.Western Blot检测表明NONFH组中FATP-1与正常组相比较，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05），PAI-1在NONFH组与正常组相比较，两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；4.NONFH病理结果显示血瘀质NONFH骨髓脂质堆积，FATP-1、CPI-17、ROS及PAI-l在骨髓脂肪细胞中表达呈强阳性（++++）。.科学意义：进一步明确了NONFH的高发体质类型，发现血瘀质是NONFH的高发中医体质，获得了血瘀质NONFH在FATP-1等脂质代谢相关通路的表达水平，为NONFH进一步从脂代谢相关机制深入研究提供了理论依据。