Lipocalin2在结直肠癌中基于NF-κB的转移机制研究

转移是造成肿瘤患者死亡的最主要原因，肿瘤细胞获得更高的迁移、侵袭能力与转移关系密切。Lipocalin2（LCN2）是我们在前期实验中，比较具有相同遗传背景、不同转移潜能的人结肠癌细胞株SW480和SW620的分泌蛋白质组获得的，荧光定量PCR和Western blot验证了LCN2确实在高转移潜能的SW620中显著下调。免疫组化结果发现LCN2和NF-κB正相关、和β-catenin负相关。上皮细胞向间质细胞转化（EMT）增加肿瘤细胞迁移、侵袭能力，NF-κB可通过多种途径调控EMT的发生。本项目以结肠癌SW480、SW620细胞系作为研究对象，通过干扰/增加LCN2的表达，增强/抑制NF-κB功能，并观察EMT相关特征的改变，明确LCN2在NF-κB调控EMT过程中的作用，以及铁离子对NF-κB/LCN2-EMT的影响，探索LCN2在肿瘤转移中的可能机制。

Lipocalin2 (LCN2)可以作为“压力蛋白”激活离子依赖的酶防御系统，引发固有免疫，其在肿瘤转移中的作用及机制尚不明确，其与上皮间质转化（EMT）的关系最早是在肾间质纤维化中发现的。本项目以结直肠癌为研究对象，探索LCN2是否可以通过NF-κB调控EMT。我们选取了LCN2低表达的SW620细胞系构建LCN2过表达细胞系，LCN2高表达的SW480细胞系构建LCN2干扰细胞系，从蛋白水平和RNA水平证明了LCN2可以促进上皮标志物的表达，抑制间质标志物的表达，这一结果在临床组织样本中也得以验证。细胞侵袭和迁移能力实验证明LCN2可以抑制细胞的侵袭和迁移能力，体内动物实验也证明了这一点。以上结果表明LCN2可以抑制结直肠癌的EMT。同时我们发现LCN2可以抑制NF-κB的活化，而且LCN2对EMT的调控与其抑制了NF-κB的活化，下调了sanil的表达有关。另外，临床常用药物全反式视黄酸（ATRA）可以上调LCN2的表达，抑制EMT，这一过程可以被LCN2抗体拮抗。通过本项目的研究，最终阐明了LCN2抑制结直肠癌转移的机制之一，并对临床可能的干预措施进行了探索，为以后进一步明确机制并实施临床干预奠定了基础。