宽叶荨麻抗类风湿关节炎物质基础及作用机理的研究

宽叶荨麻Urtica laetevirens为常用的民间药，具有祛风定惊、温胃消食等功效，主要用于风湿性关节炎、风疹等病的治疗。在前期对宽叶荨麻抗类风湿关节炎作用的研究中我们发现，宽叶荨麻水提物在1.62g/kg剂量下对大鼠佐剂性关节炎具有较强的抑制作用，作用强于阳性对照雷公藤。但目前宽叶荨麻治疗类风湿关节炎的物质基础和作用机理尚不明确，从开发利用荨麻属植物出发，有必要对其抗类风湿关节炎的物质基础和作用机理进行深入系统的研究。本研究旨在以大鼠佐剂性关节炎模型为研究对象，筛选出宽叶荨麻抗类风湿关节炎的活性部位，并对活性部位的化学成分进行研究，明确其抗类风湿关节炎的物质基础，在此基础上通过宽叶荨麻及其活性成分对大鼠佐剂性关节炎模型免疫抑制机理的研究及对炎性细胞因子影响的研究，探讨其抗类风湿关节炎的免疫作用环节，以阐明宽叶荨麻治疗类风湿关节炎的物质基础和作用机理。

本研究分别从化学成分、体外活性、体内活性不同方面探讨了宽叶荨麻抗类风湿关节炎的物质基础和可能的作用机制。化学研究，从宽叶荨麻的95%乙醇提取物中分离鉴定了34个化合物，所有化合物均首次从宽叶荨麻中分离得到，而且4个化合物为新化合物。体外活性研究，分别考察了不同产地宽叶荨麻及从宽叶荨麻中分离到的化合物对人类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖的影响。结果表明，4个产地的宽叶荨麻都显示了一定的抑制MH7A细胞增殖的作用，其中鲁甸产宽叶荨麻显示了较强的抑制作用。在被检测的化合物中，6个化合物显示了不同程度的抑制MH7A细胞增殖的作用，其中化合物5α,6β-二羟基-胡萝卜苷显示了较强的抑制作用，且DNA片段化分析结果表明，其能显著诱导MH7A细胞凋亡。体内活性研究，在成功建立佐剂性关节炎（AA）大鼠模型的基础上观察宽叶荨麻提取物对大鼠佐剂性关节炎的防治作用，并检测其对AA大鼠血清中炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平的影响。结果显示，与模型组比较，宽叶荨麻可显著减轻AA 大鼠继发性足肿胀，抑制炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的产生。通过本项研究，明确了宽叶荨麻抗类风湿关节炎的物质基础，并初步阐明了其抗类风湿关节炎可能的机制是通过抑制滑膜细胞增殖、诱导滑膜细胞凋亡，从而对骨损伤的病理进程起到保护作用。另外，通过减少炎性细胞因子产生，恢复细胞因子的网络平衡，调节异常的免疫功能也是宽叶荨麻发挥治疗类风湿关节炎作用的重要途径。