Ghrelin对动脉粥样硬化易损斑块内皮细胞/周细胞稳定性的影响及机制研究

The neovascularization in atherosclerosis (AS) plaque are immature due to the lack of periplasmic encapsulation. It leads to the formation and rupture of vulnerable plaques. We have found that ghrelin can promote the stability of vulnerable plaque by inhibiting intraplaque neovascularization. However, there are no previous studies investigating the effects of ghrelin on endothelial cell / peripheral cell stability and the mechanisms of ghrelin on vascular mature. Endothelial cell recruitment through the bFGF / PDGF-BB / PDGFR-AB pathway is the key to achieving vessel maturation. In the present study, we establish a rabbit model of vulnerable plaque of abdominal aorta by balloon injury and high-fat diet. We observe the effects of ghrelin on intraplaque vessel maturation and bFGF / PDGF-BB / PDGFR-AB pathway changes. In addition, we observed the duration of neovascularization and the expressions of related factors. We compare the chemotaxis of endothelial cell to pericytes before and after silencing PDGFR-AB by using RNAi technique, and clarify the target of ghrelin intervention on bFGF / PDGF-BB / PDGFR-AB pathways. It might provide new ideas to stable atherosclerotic plaques.

动脉粥样硬化(AS)斑块内新生微血管由于缺乏周细胞的包绕致其新生血管不成熟，是易损斑块形成与破裂的重要原因。我们发现，ghrelin可抑制AS斑块内血管新生促进易损斑块的稳定性。然而，ghrelin对易损斑块内皮细胞/周细胞稳定性的影响及血管成熟机制未见报道。内皮细胞经bFGF/PDGF-BB/PDGFR-AB通路介导周细胞募集是实现新生血管成熟的关键。球囊损伤+高脂饮食构建兔腹主动脉易损斑块模型，观察ghrelin对斑块内新生血管成熟及bFGF/PDGF-BB/PDGFR-AB通路变化；利用体外血管生成模型及内皮细胞与周细胞共培养模型，观察ghrelin对体外新生血管维持时间及相关因子的表达；RNAi技术沉默周细胞的PDGFR-AB，对比沉默前后内皮细胞对周细胞趋化能力的变化，阐明ghrelin干预bFGF/PDGF-BB/PDGFR-AB通路的靶点。为探寻稳定或逆转AS斑块提供新思路。

动脉粥样硬化性心血管疾病（(Atherosclerotic cardiovascular disease, ACVD)）是一组主要累及全身大、中型弹力肌型动脉的血管硬化性疾病，以脑动脉、冠状动脉、腹主动脉和下肢动脉多见，其特征是动脉内膜脂质沉积和粥样硬化斑块的形成，是急性心脑血管事件发生的重要原因。研究发现，动脉粥样硬化(AS)斑块内广泛存在大量薄壁、新生不成熟微血管，其可促进斑块生长和斑块内出血，与易损斑块的形成和破裂密切相关。动脉粥样硬化斑块破裂和继发性血栓形成是急性心脑血管疾病的主要病理生理机制，其中斑块内出血是导致易损粥样斑块破裂的重要触发因素。动脉粥样硬化(AS)斑块内新生微血管由于缺乏周细胞的包绕致其新生血管不成熟，是易损斑块形成与破裂的重要原因。.Ghrelin 是一种 28 个氨基酸的肽激素，作为生长激素受体(GHSR)的内源性配体，我们前期发现，Ghrelin可抑制AS斑块内血管新生促进易损斑块的稳定性。然而Ghrelin 对动脉粥样硬化小鼠脑微血管通透性的影响及可能的机制，目前无研究报道。.本项目以动脉粥样硬化小鼠脑微血管周细胞为主要研究对象，观察 Ghrelin 能否对动脉粥样硬化小鼠血脑屏障（ BBB） 微血管通透性和周细胞具有调控作用及可能的机制：我们发现：①动脉粥样硬化（AS）小鼠血清炎症因子高表达，血脂水平升高，导致脑微血管周细胞数量减少、形态异常，脑微血管渗漏， Ghrelin可下调AS小鼠血脂及炎症因子IL-6、MCP-1、TNF-α和ox-LDL的水平；②Ghrelin改善 AS小鼠血脑屏障（BBB ）通透性，减少脑微血管渗漏到脑实质；③Ghrelin干预能部分恢复周细胞在脑微血管的形态和数量，进而恢复脑微血管的功能，减少脑微血管的渗漏；④Ghrelin能抑制脑微血管周细胞的凋亡；⑤Ghrelin通过抑制P38 MAPK/JNK信号通路的活化来实现改善周细胞的炎症及凋亡。本研究在器官、细胞及分子水平上探讨了Ghrelin对动脉粥样硬化（AS）小鼠脑微血管通透性的效应及机制，为在动脉粥样硬化状态下保护脑微血管完整性提供了治疗的新思路。