埃兹蛋白调控子宫内膜细胞迁徙形成异位病灶的机制研究

埃兹蛋白（Ezrin）是膜细胞骨架连接蛋白，转导胞外信号引起细胞骨架重构和细胞运动。文献报道Ezrin促进肿瘤浸润和转移。子宫内膜异位症（EMs）患者子宫内膜细胞具有侵袭、转移等生物学特性，但Ezrin与EMs的研究尚无报道。我们前期研究发现Ezrin高表达于异位子宫内膜并可能与细胞迁徙有关。本研究拟通过观察并比较Ezrin在EMs子宫内膜组织的表达及与细胞迁徙的关系；siRNA干扰沉默Ezrin基因对内膜细胞骨架构建、粘附能力和迁徙等影响；Ezrin等蛋白在细胞迁徙过程中亚细胞定位、细胞极性、磷酸化及其前列腺素F诱导途径上调影响；免疫共沉淀检测Ezrin与迁徙相关蛋白在细胞骨架和迁徙中的共定位，旨在揭示Ezrin在子宫内膜细胞迁徙并形成异位病灶中的作用及其介导的Rho/ROCK信号传导通路调控和可能的分子机理，为EMs的防治提供新的思路。

背景：子宫内膜异位症（EMs）是一种常见良性妇科疾患，但却具有过度增殖、细胞侵袭、局部或远程转移等类似恶性肿瘤的生物学表型，发病机制不清。埃兹蛋白（Ezrin）是膜细胞骨架连接蛋白，转导胞外信号引起细胞骨架重构和细胞运动。本研究正是基于对子宫内膜细胞骨架重构、细胞迁徙及调控机制，深入探索Ezrin在子宫内膜异位症子宫内膜细胞迁徙形成异位病灶的机制。.主要研究内容：通过Western Blot、realtime RT-PCR、免疫组化检测Ezrin及其磷酸化在EMs的表达及与细胞迁徙的关系；siRNA干扰沉默Ezrin基因，检测对内膜细胞骨架构建和迁徙能力等影响；激光共聚焦观测Ezrin、微管和微丝等在细胞迁徙过程中亚细胞定位、极性；细胞迁移实验检测PGF2α诱导下对内膜细胞迁徙的影响；免疫组化检测EMMPRIN、MMP-9、c-fos、Rho/Rock I在异位内膜迁徙过程中的作用。.重要结果：Ezrin蛋白及其磷酸化水平、PKAIα、EMMPRIN、MMP-9、c-fos、Rho/Rock I在EMs患者在位内膜、异位内膜和非EMs患者子宫内膜的差异表达并可能与细胞迁徙有关；siRNA干扰沉默Ezrin基因后，细胞迁徙能力下降，RhoC、Rock表达下调；激光共聚焦显示异位内膜细胞中Ezrin蛋白极性变差，细胞微管、微丝等发生亚细胞结构变化；Ezrin蛋白通过Rho/ROCK信号传导通路调控，迁移实验中，PGF2α处理组细胞划痕更快修复，transwell实验中，PGF2α处理组细胞穿膜能力更强，导致EMs患者子宫内膜细胞骨架蛋白的重新排列分布，细胞膜的极化，改变细胞的运动能力，使内膜细胞脱离起源位置进行细胞迁徙，从而参与了EMs的发生、发展与复发。.科学意义：Ezrin在子宫内膜异位症中通过调控Rhoc/RhoA/Rock通路来促进异位内膜的迁徙；PGF2α可促进异位内膜细胞迁徙；PKAIα、EMMPRIN、MMP-9、c-fos、Rho/Rock I可能参与了异位内膜细胞的形成及迁移；Ezrin与子宫内膜异位细胞骨架重构有关。Ezrin在子宫内膜异位症细胞迁徙形成异位病灶过程中起重要作用，可能成为治疗子宫内膜异位症的一个重要靶点。