三化汤对脑缺血/再灌注损伤大鼠模型神经血管单元及神经再生的影响

缺血性中风是当前严重危害人类生命与健康的主要公共卫生问题。该项目立足传统中医理论，采用局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠模型模拟缺血性中风，选择中风病的名方三化汤为目标方剂，阐明三化汤在脑梗死后神经血管单元保护及神经再生中的作用，为中医药治疗缺血中风提供潜在的治疗靶点和开辟新的研究思路。同时，应用水通道蛋白(AQP)4 RNA干扰技术，探讨AQP4在神经血管单元保护及神经再生中的作用，揭示AQP4参与脑梗死后神经血管单元保护及神经再生的调节，开拓AQP4神经生物学的新领域。此外，将阐明三化汤的治疗学机制可能与调节AQP4的表达有关，为今后研究中医药对脑缺血损伤后神经血管单元的保护及促进神经再生的机制提供参考。最终，以验证课题假说：三化汤可能通过对脑梗死后神经血管单元的保护及诱导内源性神经干细胞的增殖、分化及迁移，促进神经功能的修复，从而有助于脑梗死的恢复，其分子机制可能与调节AQP4的表达有关。

项目的背景：缺血性中风是当前严重危害人类生命与健康的主要公共卫生问题。该项目立足传统中医理论，采用局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠模型模拟缺血性中风，选择中风病的名方三化汤为目标方剂，探讨三化汤在脑梗死后神经血管单元保护及神经再生中的作用及其机制，为中医药治疗缺血中风提供潜在的治疗靶点和开辟新的研究思路。.主要研究内容：(1)三化汤对局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠模型的神经保护作用及其机制；(2)三化汤对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型reelin蛋白及tau蛋白磷酸化的影响；(3)三化汤对脑梗死后内源性神经干细胞的增殖、分化及迁移的影响；(4)三化汤在脑梗死后促神经再生作用的分子机制；(5)基于三化汤中以大黄为主药的祛邪配伍人参扶正“标本兼治”对局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。.重要结果：(1)三化汤可改善缺血/再灌注后大鼠模型神经功能缺损症状，降低脑组织含水量，减少缺血灶周脑组织水通道蛋白（AQP4）的表达；（2）侧脑室注射AQP4-siRNA后，三化汤可以更加明显地改善神经行为学功能和脑水肿，进一步明确了其神经保护机制的靶点是通过下调AQP4表达实现的；(3)三化汤可减少tau蛋白磷酸化的表达，表明三化汤对大鼠脑缺血再灌注损伤有神经保护作用与抑制tau蛋白的磷酸化表达有关；(4)三化汤能促进大鼠局灶性脑缺血/再灌后侧脑室下区内源性神经干细胞的增殖、分化、迁移；(4)侧脑室注射AQP4-siRNA后，抑侧脑室下区神经干细胞增殖，表明AQP4参与了脑梗死后内源性神经再生，三化汤促进神经再生机制与调节AQP4表达有关；(5)大黄素与人参皂苷Rg1组分配伍较单用Rg1或大黄素能更好地改善脑缺血/再灌注大鼠神经功能缺损症状和血管屏障通透性，其机制可能是协同下调AQP4表达，从而增强神经保护作用。.关键数据及其科学意义：三化汤可通过对脑梗死后神经血管单元的保护及诱导内源性神经干细胞的增殖、分化及迁移，促进神经功能的修复，有助于脑梗死恢复，其分子机制可能与调节AQP4的表达有关。项目阐明了三化汤在脑梗死后神经血管单元的保护及促进神经再生的作用，为中医药治疗中风病提供潜在的治疗靶点和开辟新的研究思路；阐明了三化汤对脑梗死后神经血管单元的保护及促进脑内神经再生的治疗学机制可能与调节AQP4的表达有关，为研究中医药对脑缺血损伤后神经血管单元的保护及促进神经再生的机制提供参考。