FAK调控YB-1在卵巢癌淋巴转移中的作用及其机制研究

Lymph-node metastasis is the important factor of recurrence and prognosis in ovarian cancer. We previously found nuclear focal adhesion kinase (FAK) and transcription factor Y-box binding protein 1(YB-1) expression may be associated with lymph-node metastasis, and FAK inhibition enhanced chemosensitivity in taxane-resistant ovarian cancer cells. To study the effects of FAK and YB-1 on lymph-node metastasis, we set up a reliable ovarian cancer cell lines and animal models with high potential for lymph node metastasis, which has been a national patent product. Here, we utilizing mass spectrometry and ChIP-on-chip technologies to determine how FAK activate YB-1 and regulate its nuclear translocation; whether YB-1 induces the expression of cancer stem cell genes, and causes lymphatic metastasis and chemo-resistance. Furthermore, we'll investigate the effect of FAK inhibition with RNA interference or FAK inhibitor on chemosensitivity of lymphatic metastases to chemotherapy drug. This project will reveal the mechanism of lymph-node metastasis and provide a new target to prevent the lymphatic metastasis of ovarian cancer and improve the outcome of women with ovarian cancer.

卵巢癌淋巴转移是导致术后复发、影响预后的重要因素,但淋巴转移的机制不明,且缺乏有效的治疗手段。我们的前期研究发现局部粘着斑激酶(FAK) 和转录因子Y盒结合蛋白-1(YB-1) 在细胞核内的表达可能与淋巴转移相关；抑制FAK可以增强卵巢癌细胞的对化疗药的敏感性。为了进一步研究FAK调控下YB-1在卵巢癌淋巴转移中的作用及机制，我们已建立稳定的卵巢癌高/低淋巴转移细胞株和动物模型,并获得国家专利授权。本项目拟通过蛋白质谱分析和ChIP-on-chip等技术研究FAK在YB-1活化和进入细胞核过程中的调控作用，探索YB-1进入细胞核后是否能启动肿瘤干细胞特性基因，影响卵巢癌细胞的淋巴转移和化疗敏感性。进一步应用RNA干扰和相应的抑制剂研究下调FAK后，研究是否能对卵巢癌淋巴转移灶起到化疗增敏作用。本项目为卵巢癌淋巴转移的机制研究和辅助治疗策略提供了新思路。

卵巢癌是死亡率最高的妇科恶性肿瘤，淋巴转移是导致卵巢癌术后复发、影响预后的主要原因，但机制尚不明。课题组前期发现局部粘着斑激酶(FAK)与淋巴转移相关并且成功建立卵巢癌高/低淋巴结转移细胞株和动物模型并获得专利。以此为基础，本研究比较了高淋巴转移细胞株和低转移细胞株的基因谱，结果在高淋巴转移细胞株中发现8条通路表达升高，24条通路表达下降，其中FAK的表达及活化水平（p-FAK）明显升高，并且在淋巴转移患者组织样本中验证也观察到同样的现象。本研究还成功利用近红外荧光成像技术鉴定出动物模型中已发生转移的腹膜后淋巴结，为术中鉴别淋巴结避免盲目淋巴结切除的副作用提供了新方法。除此之外，课题组在研究中发现高淋巴转移细胞株相比于低转移细胞株表现出对紫杉醇的不敏感，同时前期研究也表明抑制FAK确实可通过AKT-YB-1信号通路影响卵巢癌对化疗药紫杉醇的敏感性，而化疗耐药是除淋巴转移之外又一个导致卵巢癌患者预后差的重要因素，因此本研究还对卵巢癌化疗耐药的领域进行了探索，发现卵巢癌患者群体中焦虑抑郁等慢性应激水平明显升高，且慢性应激能通过DUSP1诱导卵巢癌化疗耐药，为卵巢癌化疗耐药提供了新的干预方向并提高社会对肿瘤患者心理状态的重视。综上，本项目聚焦卵巢癌临床两个难点，为卵巢癌淋巴转移提供体内外模型并发现了关键分子FAK，同时还阐明了慢性应激在诱导卵巢癌化疗耐药中的分子机制，为卵巢癌的基础研究和临床辅助治疗提供了新思路和策略。