Gas6受体调控糖蛋白VI介导血小板活化的信号与分子机制研究

Collagen pathway is critical for platelet activation leading to thrombosis. It is important to understand the mechanism of platelet activation for the prevention and treatment of cardiovascular and cerebrovascular thrombotic diseases. Glycoprotein VI (GPVI) is the main collagen receptor on platelets. Tyro3, Axl, and Mer, three receptor tyrosine kinases are the receptors for plasma protein growth arrest specific gene 6 (Gas6) on platelets. Although several studies have indicated that Gas6 receptors regulate GPVI-mediated platelet activation, the role of each receptor remains controversial. Using single Gas6 receptor knockout mouse model, we have recently found Tyro3 and Axl, but not Mer, play more important role in GPVI-mediated platelet activation, suggesting that they are not euqally important. In this proposal, we plan to further investigate the signaling and molecular mechanisms underlying Gas6 receptor regulation of glycoprotein VI-mediated platelet activation. The results to be achieved will provide new insight into the mechanisms for platelet activation and thrombosis, and will provide the foundamental knowledge for the development of new antithrombotic drugs tartgeting Gas6 receptors.

胶原蛋白途径导致的血小板活化是血栓形成的主要环节，阐明血小板活化机制对防治心脑血管血栓性疾病至关重要。糖蛋白VI（Glycoprotein VI，GPVI）是血小板最主要的胶原蛋白受体。血浆蛋白 Growth arrest specific gene 6（Gas6）的受体包括Tyro3、Axl和Mer。目前，关于Gas6受体调控GPVI介导的血小板活化的具体作用存在争议，有研究认为三者的作用相同，但是另有研究报道Gas6受体的作用甚微。为判定Gas6受体在GPVI介导的血小板活化的作用及分子机制，最近，我们应用单一Gas6受体基因敲除小鼠模型，发现Tyro3和Axl在GPVI介导的血小板活化中的作用更重要。本项目旨在更深入研究Gas6受体调控糖蛋白VI介导血小板活化的信号与分子机制，将为阐明血小板活化和血栓形成机制提供新的认识和研究思路，并为开发以Gas6受体为靶向的抗血栓新药研发提供资料

血浆蛋白生长静止特异性基因6（Gas6）的受体包括Tyro3、Axl和Mer。有报道Gas6受体调控血小板活化的具体作用存在争议。为判定Gas6受体在血小板活化和血栓形成的作用及分子机制，最近，我们应用单一Gas6受体基因敲除小鼠模型和糖蛋白VI特异性刺激剂convulxin、poly(PHG)、CRP以及PAR1/4受体刺激剂thrombin，发现缺乏Tyro3或Axl，而不是缺乏Mer小鼠血小板经低浓度刺激剂刺激后的聚集、铺展、P-selectin选择素的表达以及整合素aIIbb3的活化均受到显著抑制，且缺乏Tyro3、Axl或Mer小鼠血小板和对照野生型血小板相比，经高浓度刺激剂刺激后，血小板聚集反应没有影响。经糖蛋白VI特异性刺激剂刺激后，缺乏Tyro3或Axl，而不是缺乏Mer小鼠血小板的信号分子如Syk、LAT、SLP-76以及PLCγ2的磷酸化均受到明显抑制。Gas6阻断性抗体孵育血小板不影响糖蛋白VI特异性刺激剂诱导的血小板聚集。人重组Gas6蛋白单独不能激活血小板发生聚集反应以及蛋白磷酸化，且人重组Gas6蛋白对刺激剂诱导的血小板聚集反应没有加强作用。抗Tyro3或Axl，而不是抗Mer的抗体抑制血小板聚集，且Tyro3或Axl，而不是Mer的胞外片段抑制血小板聚集。在激光诱导小鼠提睾肌动脉血栓模型中，缺乏Tyro3或Axl，而不是缺乏Mer的小鼠体内血小板积聚受到显著抑制。总之，Tyro3或Axl，而不是Mer对于血小板活化和体内血栓形成发挥重要作用，且通过受体之间的结合放大血小板的活化信号。通过本项目的研究，深入了解Gas6受体调控血小板活化和血栓形成的机制，为阐明血小板活化和血栓形成机制提供新的认识和研究思路，并为开发以Gas6受体为靶向的抗血栓新药研发提供资料