染色体脆性位点9q32区miR-455对PI3K信号通路的调控机制及其在宫颈癌中的临床病理学意义研究

流行病学资料显示染色体9q32杂合性丢失是宫颈癌发生的关键因素,但其具体的分子机制尚不清楚。PI3K信号的异常激活参与宫颈癌的发生发展，但其活化机制仍有待阐明。基于生物信息数据库的基因扫描，我们发现miR-455是定位于9q32区的唯一microRNA分子，细胞与组织水平的初步研究发现miR-455在宫颈癌中表达缺失；数据库分析与分子水平实验证实PI3K调节亚单位R1是miR-455的功能靶基因。基于此，本项目将：1）研究miR-455 是否是宫颈癌中调控PI3K信号活性的关键分子；2）阐明miR-455对宫颈癌细胞增殖等生物学特征的影响，并鉴定其是否主要通过PI3K信号介导发挥作用；3）从组织标本水平鉴定9q32缺失、miR-455表达以及PI3K活性之间的关联性，并阐明其临床病理学意义。本项目关于miR-455/PI3K的研究将从分子水平建立并解释9q32缺失与宫颈癌发生之间的关联性。

流行病学资料显示染色体脆性位点9q32区缺失和PI3K信号的异常激活是多种肿瘤发生两大关键因素。基于生物信息数据库的基因扫描，我们发现miR-455是定位于9q32区的唯一microRNA分子。细胞与组织水平检测证实miR-455在宫颈癌中表达缺失是9q32区域杂合型丢失和启动子区CpG岛高甲基化协同作用的结果。miR-455通过靶向调控p85α的表达，可特异性地在PTEN低表达宫颈癌中影响PI3K信号活性。因此miR-455通过改变细胞生长、凋亡等生物学特征在宫颈癌中发挥了抑癌基因功能。更重要的是我们发现miR-455表达缺失的宫颈癌细胞更易产生PI3K抑制剂抵抗。我们的结果证实了染色体脆性位点9q32区缺失参与宫颈癌的肿瘤进程主要通过对miR-455和PI3K信号活性地调控来实现。此外我们还阐明了p85α在宫颈癌中的独特的致癌效应。 我们的结果为进一步探讨PI3K信号在肿瘤发生中的复杂作用开辟新的视角，并且将为PI3K抑制剂的进一步临床应用提供研究基础。. 此外，由于对于微量样本miRNA精确定量方法的缺乏，我们对现有的两种miRNA定量常用方法进行了整合、优化，建立了一种新的兼顾经济性、敏感性和特异性的miRNA实时定量新方法。该方法可同一样本的mRNA和microRNA可以同步检测，较好地解决了miRNA与靶基因检测扩增效率差异的问题。