CPS1等尿素循环关键酶在AFB1致小鼠肝脏病变过程中的功能及其调控研究

黄曲霉毒素是一种对人类和畜禽危害极大的真菌毒素，主要诱使动物发生肝癌。本课题组已经采用双向电泳及质谱分析了黄曲霉毒素B1（AFB1）对小鼠肝脏的影响，发现一个与尿素循环相关的酶CPS1发生显著下调。本研究继续以CPS1为出发点，探索CPS1等尿素循环关键酶在AFB1致小鼠肝脏病变过程中的功能及其与互作蛋白的调控关系。通过RNA干扰、过表达等手段研究CPS1对细胞形态与增殖、肿瘤细胞形成与迁移的影响，以及对AFB1的耐受能力；并用小鼠肿瘤模型分析CPS1与肝脏病变的关系。再从蛋白质互作关系，寻找CPS1和OTC等的互作蛋白，研究CPS1和OTC及其调节亚基的互作和调控关系，明确CPS1和OTC等与肝脏病变的关系，以期阐明AFB1在致动物肝脏病变中CPS1等尿素循环关键酶的功能和调控关系。研究结果可加深对黄曲霉毒素引起肝脏病变机理的了解，为制定更加完善的黄曲霉毒素中毒防治和治疗提供理论参考。

经过一年的时间，已经全部完成项目任务。黄曲霉毒素是一种对人类和畜禽危害极大、最常见的真菌毒素，主要诱使动物发生肝癌。本课题组已经采用双向电泳及质谱分析了AFB1对小鼠肝脏的影响，发现其中一个与尿素循环相关的酶CPS1发生显著下调蛋白。本研究以CPS1为出发点，探索了CPS1等尿素循环关键在AFB1致小鼠肝脏病变过程中的功能及其与互作蛋白的调控关系。通过RNA干扰、过表达等手段研究CPS1对细胞形态与增殖、对AFB1的耐受能力。并从蛋白互作关系，一方面通过预测，找到了OTC和SIRT5，并利用Far Western验证了其互作关系；另一方面，利用CO-IP寻找CPS1的互作蛋白，深入研究CPS1与调节亚基的互作及调控关系，明确CPS1与肝脏病变的关系，以期阐明黄AFB1在致动物肝脏病变中CPS1等尿素循环关键的功能和调控关系。研究结果可加深对黄曲霉毒素引起肝脏病变机理的了解，为制定更加完善的黄曲霉毒素中毒防治策略和治疗提供理论参考。