肽核酸杂交诱捕实时荧光PCR方法研究

肽核酸杂交诱捕实时荧光PCR方法，是以N端特异共价结合在特殊材料PCR管内壁的肽核酸（PNA）作为杂交探针，利用PNA与DNA/RNA超强的结合能力，定向诱捕带菌植物组织裂解液中的目标核酸，冲洗去除非目标杂质完成核酸提取；以诱捕所得核酸为模板进行PCR反应及PCR产物的荧光探针实时特异性检测。该方法在同一PCR管内可完成目标核酸提取、扩增及特异性检测全过程，所得核酸纯度高，不受材料限制，较好地解决了部分植物核酸提纯困难、PCR扩增效率不高的难题，减少了操作步骤及实验室污染，提高检测速度，保证了结果可靠性。本研究提供一种新的具有自主知识产权的植物病原菌快速准确检测方法, 研究建立番茄环斑病毒、苹果丛枝植原体、梨火疫细菌、烟草霜霉真菌为代表的四类重要检疫性病原菌及转基因油菜的肽核酸杂交诱捕检测方法，在动植物检疫领域具有重要意义，在医学、科研等相关领域也具有良好的应用前景。