从FTZ调节肝脂酶的机制研究“调肝降脂”新理论

高脂血症的发病率高达18.6％，与心脑血管疾病密切相关，危害性大。申请人经过系统研究后，认为"肝"的功能失调是该病发病的关键，提出了"调肝降脂"新理论。并据此理论组方"复方贞术调脂方"（FTZ）治疗高脂血症，证明安全有效，能显著降低TG、TC、LDL-C，同时升高HDL-C。降脂机制研究证明FTZ上调肝脂酶（HL）表达是其降血脂的重要机制；同时还发现FTZ能上调肝脏重要脂质代谢转录调控因子PPARα的表达。据此，我们认为FTZ是通过调节PPARα间接调控HL的表达，从而发挥降脂作用的。为证明PPARα在FTZ调控HL表达中的作用，本项目拟通过RNA干扰特异性沉默PPARα的表达等方法，研究阻断PPARα的作用后FTZ调节HL表达的改变情况，分析FTZ调节HL的作用环节及FTZ调节血脂的作用机制，为阐明"调肝降脂"新理论的实质及对FTZ降脂活性成份的进一步筛选提供科学依据和实验支持。

高脂血症的发病率高达18.6％，与心脑血管疾病密切相关，危害性大。经过系统研究，我们认为“肝”的功能失调是该病发病的关键，提出了“调肝降脂”新理论，并组方“复方贞术调脂方”（FTZ）治疗高脂血症安全有效，能显著降低TG、TC、LDL-C，同时升高HDL-C。. 利用大鼠、家兔、ApoE-/-小鼠等多种高脂血症动物模型、Chang’s肝细胞和HepG2细胞和细胞分子生物学技术进行实验研究发现: (1)FTZ的降脂作用显著；（2）FTZ上调肝脂酶（HL）表达是其降血脂、降TG的重要机制；（3）FTZ能上调肝脏重要脂质代谢转录调控因子PPARα的表达、FTZ血清中化学成分齐墩果酸、小檗碱等成分能促进肝细胞PPARα和HL基因蛋白表达并增强HL活性；而丹参酮则能抑制肝细胞PPARα和HL表达，并抑制HL活性；（4）通过RNA干扰特异性沉默PPARα表达等方法筛选获得的小RNA干扰序列U4能使Chang’s肝细胞和HepG2细胞的PPARα表达沉默达70%以上；用U4特异性沉默肝细胞PPARα表达、或用PPARα特异性阻断剂MK866拮抗PPARα活性可明显抑制FTZ和小檗碱等对HL mRNA和蛋白表达及其活性的促进作用，提示PPARα在FTZ调节肝细胞HL表达和活性中有重要作用；（5）FTZ降TC作用与其抑制HMG-CoA还原酶的表达和活性，上调胆固醇7-α羟化酶（CYP7A1）表达及其活性有关，并且PPARα在FTZ对CYP7A1的mRNA和蛋白表达调节中也有重要作用；（6）从整体和细胞、分子水平，揭示了FTZ调节HL的作用环节及FTZ调节血脂的作用机制，初步证实了我们提出的假说----“FTZ可通过齐墩果酸、小檗碱等多个入血成分调节PPARα，进而调控HL、CYP7A1的mRNA和蛋白表达及活性，从而发挥综合降脂作用”。. 本项目研究发表研究论文8篇，其中SCI 4篇、中文核心期刊2篇；申报发明专利3项，授权2项；为阐明FTZ通过方中多种成分，多环节、多靶点实现的“调肝降脂”新理论的实质、为FTZ用于临床防治血脂异常及FTZ降脂活性成份的进一步筛选提供科学依据和实验支持，初步阐明了FTZ降血脂主要作用机理和药效物质基础，丰富了中医“调肝降脂”理论的科学内涵。