健脾、疏肝法对感染后肠易激综合征防治效应的肠道免疫屏障差异研究

The research of Traditional Chinese Medicine thinks the pathogenesis.of Post-infectious Irritable Bowel Syndrome（ PI-IBS）is depend the Terma evil in the body as a special type of IBS after infection，Abdominal pain , diarrhea and other symptoms and signs often evoked in the case of external factors such as depression, anxiety .So the clinicl treatment must be fundamental when in a desperate state 。The previous research have proved the method of Strengthening the spleen and Smoothing the liver can improved the Intestinal immune barrier of irritable bowel syndrome after different time point of acutetrichinella infection．。But the mechanism hypothesis of the Strengthening the spleen and Smoothing the liver cure the PI-IBS is to be proven by further experiments. The project will proposed the common intestinal infection of Trichinella spiralis in animal models, research the Intestinal mast cells in the immune defence, SP material and mesenteric lymph node, peripheral blood regulatory t-cells and related inflammatory mediator TGF-of Beta 1, the proportion of toll receptors signal transduction pathway of intestinal immune defence component level correlation，within the TONG XIE YAO FANG\SHEN LING BAI ZHU SAN\SI NI SAN inorder to find the different of Intestinal immune barrier about Strengthening the spleen and Smoothing the liver during Post-infectious irritable bowel syndrome.

感染后肠易激综合征（post-infectious irritable bowel syndrome, PI-IBS）为胃肠感染之后出现IBS症状的一类特殊IBS，传统医学认为其发病为邪气侵犯人体后伏藏于内，其症状、体征常在外因如抑郁、焦虑下诱发，故临床上当"急则治其标，缓则治其本"。既往研究已证实健脾疏肝法可通过调节肠道免疫治疗IBS，但健脾法及疏肝法在PI-IBS的不同阶段施治是否具有肠道免疫学差异有待进一步研究证实。本课题拟采用常见的肠旋毛虫感染动物模型，分别采用经典方剂痛泻药方、四逆散、参苓白术散为工具药，围绕肠道免疫屏障中的肥大细胞、SP物质、外周血和肠系膜淋巴结中调节性T细胞的比例及相关炎症介质TGF-β1、toll受体信号转导通路等肠道免疫屏障组分变化高低进行相关研究，以探讨在PI-IBS发病过程中，健脾法与疏肝法对PI-IBS不同阶段的防治效应的肠道免疫学机制差异。

肠易激综合征（irritable bowel syndrome ,IBS）是一种世界范围内发病率较高的以排便习惯改变，粪便性状异常和腹痛、腹部不适等为主要特征的系列症候群。其中低度炎症以及肠道粘膜免疫紊乱作为IBS的可能发病机制即PI-IBS（（post-infective irritable bowel syndrome）的提出近年来尤其受关注。本课题拟采用常见的肠旋毛虫感染动物模型，围绕肠道免疫屏障中的 5-HT及相关炎症介质TGF-β1等水平肠道免疫屏障组分变化高低进行相关研究，通过采用LC-MS/MS技术对PI-IBS大鼠血清、结肠和脑组织的5-HT含量的测定，并研究参苓白术散、四逆散和痛泻药方对PI-IBS模型大鼠的抗PI-IBS作用，研究结果发现：与正常大鼠相比，PI-IBS大鼠结肠中TGF-β1、p-p65和TLR4的表达水平明显增高(P<0.05)。参苓白术散组、四逆散组和痛泻药方组给药4周可显著降低PI-IBS大鼠结肠TGF-β1、p65和TLR4的表达水平(P<0.05)，得出以下结论：参苓白术散、四逆散和痛泻药方通过调控TGF-β1-TLR4-NF/kB通路，从而发挥保护PI-IBS大鼠的结肠黏膜作用。 与最开始提出的假说不同，我们在此次试验中发现疏肝法、健脾法及疏肝健脾法对5-HT及TGF-β1-TLR4-NF/kB通路的影响趋于一致，由于在预实验过程中发现预防组对以上信号通路的影响甚微，所以未进行进一步的检测，直接改为观察疏肝法、健脾法及疏肝健脾法对PI-IBS肠道免疫屏障的相关研究。由此我们得出以下推论：.1、疏肝法、健脾法、疏肝健脾法对PI-IBS具有一定的治疗效应，其作用机理可能与调节5-HT及调控TGF-β1-TLR4-NF/kB通路有关；.2、中医不同治法之间未发现有显著性差异，这可能与中医疏肝即可健脾有关，从而间接地降低炎症因子的表达，提高肠道免疫屏障功能。.3、预防性治疗用药在此次动物实验身上并未看到有显著性效应机制，这可能与造模周期长，用药时间过早，相关分子水平变化不明显有关。