牛黄解毒片中人工牛黄与雄黄配伍易引起慢性砷中毒的机理研究

Niuhuang Jiedu Pian is a traditional Chinese prescription for clearing heat and detoxicating. Chronic arsenic poisoning cases have been reported repeatedly since natural bezoar gave way to the artificial bezoar. It is verified that the adverse drug reaction is related to the realgar in prescription, however, the pathogenesis is not yet clear. Combination use of bezoar and realgar in this prescription is classical in Traditional Chinese Medicine. Our research group found that different chemical constituent and structures in various bezoar, may take great influence on the dissolution and valence state of arsenic in realgar. Therefore, we infer that artificial bezoar in Niuhuang Jiedu Pian is likely to be one of the major causes of chronic arsenic poisoning. The research is planned to study arsenic absorption, distribution and excretion of Niuhuang Jiedu Pian, which is made of different bezoar, by means of a developed in vivo arsenic speciation analysis method, in vitro arsenic analysis stimulating in vivo absorption, cytotoxicity test, cell separation technique, cell microscopy technique as well as certain animal trial. The research will focus on the target locations and existing forms of arsenic in major tissues and organs from animal and cellular level, investigate the mechanisms of chronic arsenic poisoning caused by the prescription comprehensively, clarify how the quality of bezoar in Niuhuang Jiedu Pian may affect its toxicity. The study will verify the rationality ofcompatibility and the substitution of artificial bezoar, provide a train of thought for researching quality and safety of the same species to ensure the safety of drug.

牛黄解毒片为清热解毒类常用中药，自处方中牛黄改为人工牛黄后，其慢性砷中毒病例屡有报道，已证实该不良反应与处方中雄黄有关但发病机理尚未明确。本方中雄黄与牛黄是我国中医的经典配伍，本课题组在前期研究中发现，不同品种牛黄所含成分和结构类型的不同会对雄黄的砷及其价态的溶出有很大影响，推测牛黄解毒片使用人工牛黄可能是导致慢性砷中毒的主要原因之一。拟采用开发的体内砷形态分析技术、模拟体内吸收的砷体外分析技术、细胞毒性试验、细胞分离技术、细胞电镜技术及一定的动物实验，研究不同牛黄制成的牛黄解毒片在体内的砷吸收、分布和排泄情况，从动物和细胞水平研究砷在主要组织器官中的靶点位置和存在形式。综合探讨本品慢性砷中毒的产生机制，阐明牛黄解毒片中牛黄品质对其毒性的影响。为中医配伍的合理性论证及本品处方中牛黄是否可被人工牛黄替代提供基础理论依据，为同类型中成药的质量和安全性研究提供思路，保障用药安全。

牛黄解毒片为清热解毒类常用中药，近年来其慢性砷中毒病例屡有报道，本课题通过建立牛黄品质鉴定技术、体内砷形态分析技术、模拟体内吸收的砷体外分析技术等手段，首次将体内砷形态与动物脏器组织中砷的分布结合起来，证明了天然牛黄对于雄黄的减毒作用优于人工牛黄，说明牛黄解毒片中采用人工牛黄替代天然牛黄的不合理性，亟需进行纠正。. 本课题通过合理设置对照组，证实了制剂组中无机砷、价态砷和总砷的体内吸收量远低于单纯雄黄组，且两者在器官中的蓄积程度有所不同，提示配伍对于降低雄黄的毒性具有重要的意义，雄黄单方的研究并不能代表各雄黄制剂中的情况，牛黄解毒片中各药味的配伍有效降低了雄黄的毒性，保证了制剂的安全性，颠覆了目前常采用雄黄单方研究的结果来证明所有含雄黄制剂毒性的思路。. 通过对动物实验得到的各组织和脏器、对细胞分离得到的各细胞组分进行研究，得到不同牛黄制牛黄解毒片、不同牛黄与雄黄的配伍等在动物体内的吸收、分布和排泄情况，得到了被毛是小鼠砷排泄的重要器官这一关键结论，为后续的进一步研究奠定了扎实的基础，并拓展了含雄黄药物的研究领域；.对雄黄引起的慢性砷中毒机制进行了初步探讨，认为主要是机体对于砷的代谢能力存在饱和现象，尤其是肝、肾，在超剂量或长期服用含雄黄药物的情况下，肝的代谢和肾的排泄达到饱和，肝的代谢率和肾的排泄率将稳定在一个相对固定的速率上，机体对砷的排出量不能抵消摄入砷量，砷就会蓄积在各组织和脏器中，和组织或脏器中相关物质结合，造成机体的损伤；如果摄入砷长期维持高剂量，多余的砷将转移到皮肤中储存，即导致慢性砷中毒常见的皮肤症状。. 本研究有效揭示了为何牛黄解毒片会产生慢性砷中毒的原因，证明了天然牛黄对于雄黄的减毒作用优于人工牛黄，建议首先要合理使用含雄黄类药物，做到中病即止，不能超量或过量使用；产生慢性砷中毒反应，应及时采取必要手段防止病情的进一步恶化，以免造成不可逆的损伤。