基于水通道蛋白对增液汤“增水行舟”疗效机制研究

增水行舟法为温病学家吴鞠通创立,用于温病后期因"津液不足,无水舟停"所致的津亏便秘,以玄参、麦冬、生地重剂合方,名增液汤。本项目创新研究增液汤的治疗范围和作用机制，通过前期实验结果发现，增液汤可明显增强水通道蛋白AQP5在口燥模型鼠颌下腺中的表达，对干燥综合征口燥症状有一定预防及治疗作用，表明增液汤可促进腺体分泌，起到"增水"之效。本项目欲优化复制出符合中医病因病机和"证"的口燥与肠燥动物模型，并利用免疫组化法和Western blot印迹分析法，在前期口燥模型研究基础上继续探索在增液汤干预下肠燥模型肠道津液变化与水通道蛋白分布和表达的相关性，并深入筛查免疫系统可能存在的相关影响因素，充实"增水行舟"法的内涵和外延。本项目的科学意义在于对增液汤"增水行舟"的创新性探索，丰富中医药基础理论；扩展方剂临床治疗范围；提出明确的作用靶点和机制；并为研发治疗水液代谢疾病的新药提供详实数据。

“增水行舟”法为温病学家吴鞠通创立，用于温病后期因“津液不足，无水舟停”所致的津亏便秘，以玄参、麦冬、生地重剂合方，名增液汤。本项目基于临床实践和理论认识，认为增液汤作为养阴基础方剂“非独润肠，亦润五脏”，可扩展应用于自身免疫性疾病干燥综合征的治疗，通过实验研究揭示其治疗机理。在增液汤药学工艺优化研究后，分别进行pSS模型复制、特异性指标观察、病理及免疫组化研究，Western blot印迹分析等研究内容，获得一些新的研究发现：1、pSS模型颌下腺AQP1、AQP5蛋白表达规律具有差异性及增液汤对二者有调节作用。2、增液汤在不同病理时期的治疗效果和作用靶点存在差异。3、不同工艺制剂的增液汤对水通道蛋白的调控规律有差异，提取制剂对水通道蛋白的促进作用更明显。4、发现增液汤在pSS模型不同组织中调控水通道蛋白分布和表达的规律。5、在pSS模型复制35天时期，两种工艺制剂的增液汤对水通道蛋白的调控规律不同，说明配伍组分不同的增液汤在35天模型中参与的免疫机制存在差异。6、AQP1是机体分布最广泛的水通道蛋白亚型，研究发现增液汤可作用于多组织中的AQP1，平衡及调节组织和细胞液体含量起到“增水”作用，证明了增液汤作为养阴基础方作用于机体多组织的合理性。本项目的科学意义在于扩展增液汤功效及临床治疗范围；在pSS模型腺体萎缩，分泌减少，津液亏乏的内燥状态下，探索增液汤的具体作用靶点；增液汤通过调控颌下腺等组织中水通道蛋白AQP1、AQP5、AQP8的表达和分布，调节水分转运速率,增加腺体分泌，恢复组织液体含量，模拟出“增水行舟”中“增”和“行”的过程和机制，充实和丰富“增水行舟”的内涵与外延；水通道蛋白可能是津液病证产生的分子学基础，本项目为中医药调控水通道蛋白治疗人体水液代谢疾病的新药开发提供详实数据。