转化生长因子β1-Smad信号转导通路诱导胆管癌上皮间质转化及神经浸润的实验研究

胆道系统被周围丰富的自主神经所支配，而胆管癌沿神经周围间隙浸润是继直接浸润、种植、淋巴道和血道转移外的第五种独立存在转移途径，是胆管癌比较独特的转移方式，也是手术难以根治的重要原因。在容易发生神经浸润的肿瘤中，转化生长因子(TGF)β1过量表达于神经和肿瘤细胞中，提示TGFβ1-Smad信号转导通路与胆管癌周围神经浸润存在重要联系,相关研究还显示胆管癌上皮间质转化（EMT）在胆管癌浸润转移中也起到重要作用。本研究基于课题组前期对胆管癌EMT及神经浸润的相关研究，深入探索两者之间的相互关系，并以TGFβ1-Smad信号转导通路为突破口，针对Smad4在TGFβ1-Smad信号转导通路中的核心作用，利用基因重组及小RNA干扰技术，转染体外胆管癌细胞，干预相关因子的表达，并进行细胞体外实验及荷瘤裸鼠体内实验，深入探讨TGFβ1-Smad信号转导通路在诱导胆管癌EMT及神经浸润的作用。

胆道系统被周围丰富的自主神经所支配，而胆管癌沿神经周围间隙浸润是继直接浸润、种植、淋巴道和血道转移外的第五种独立存在转移途径，是胆管癌比较独特的转移方式，也是手术难以根治的重要原因。在容易发生神经浸润的肿瘤中，转化生长因子(TGF)β1过量表达于神经和肿瘤细胞中，提示TGFβ1-Smad信号转导通路与胆管癌周围神经浸润存在重要联系,相关研究还显示胆管癌上皮间质转化（EMT）在胆管癌浸润转移中也起到重要作用。本研究基于课题组前期对胆管癌EMT及神经浸润的相关研究，深入探索两者之间的相互关系，并以TGFβ1-Smad信号转导通路为突破口，针对Smad4在TGFβ1-Smad信号转导通路中的核心作用，探讨TGFβ1-Smad信号转导通路中TGFβ1与Smad4基因对胆管癌细胞Snail基因、Slug基因、上皮细胞钙粘蛋白（E-Cadherin）以及波形蛋白（Vimentin）表达的影响，深入探讨TGFβ1-Smad信号转导通路在诱导胆管癌EMT及神经浸润的作用。从而界定TGFβ1与Smad4基因对胆管癌EMT的作用，为胆管癌的药物治疗提供相关理论依据。研究中发现TGFβ1可通过TGFβ信号转导通路对胆管癌细胞EMT的发生发挥重要作用，而Smad4参与的信号转导通道无法独自完成胆管癌EMT的诱导，需与其它信号通道共同诱导胆管癌EMT的发生，以此可说明通过对TGFβ1和Smad4的调控可干预胆管癌EMT的发生机制。同时研究还发现，wnt2b可以通过Wnt/β-catenin信号通路及TGFβ1-Smad转导通路共同调节胆管癌EMT的发生，且两通路之间在调节EMT的作用中存在轴连关系。通过研究Wnt2b调节胆管癌EMT的分子机制，针对Wnt2b的分子药靶有效的遏制胆管癌EMT现象，遏制胆管癌早期浸润转移。