肝刺激因子稳定线粒体膜孔道通透性的研究

非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是一种研究危害人类健康的疾病之一。目前，虽有报道显示NASH发病与线粒体功能紊乱有关，但确切机制不详。本课题基于前期发现的NASH病变中线粒体膜孔道通透性改变导致细胞凋亡/死亡这一事实，拟对肝刺激因子（HSS）保护线粒体孔道靶蛋白进行研究。采用免疫共沉淀方法（Co-IP）找寻与HSS相互作用的靶蛋白，并借助于质谱分析手段初步确定靶蛋白。利用荧光共振能量转移（FRET）技术研究活细胞内HSS 与靶蛋白之间的相互作用。最后利用人工构建的蛋白磷脂囊泡研究HSS对膜孔道的调节作用。本课题旨在解决HSS通过稳定线粒体孔道通透性，抑制线粒体通透性转换（MPT），从而达到保护肝细胞，抑制细胞凋亡/死亡的分子机制，提供理论依据。

非酒精性脂肪性肝炎（NASH）目前已经成为严重危害人民健康的疾病之一，NASH的发生可能与肝细胞线粒体病变有关，我们前期研究成果表明肝刺激因子（HSS）具有保护线粒体的功能。本课题通过免疫共沉淀等蛋白质学相关方法证实，与HSS具有相互作用的线粒体孔道蛋白是腺苷酸转位酶（ANT），并通过双向免疫共沉淀，GST pull-down，免疫荧光共定位等多种方法证实了HSS与ANT的相互作用，并在一定程度上揭示了其相互作用的潜在区域。本课题解析HSS稳定线粒体膜孔道通透性，抑制线粒体通透性转换（MPT），从而保护肝细胞，抑制细胞凋亡或死亡的现象，提供了初步的分子生物学靶点，为进一步深入研究HSS作用机制提供了必要的理论依据。