p38 MAPK信号通路活化在肠缺血再灌注肺损伤的作用机制研究

肠缺血再灌注（II/R）常见于严重创（烧）伤、休克、感染及危重病患者，II/R除引起肠道局部损伤外，导致全身远隔器官损害，特别是急性肺损伤，但有关II/R引起肺损伤中的细胞内信号转导机制目前尚不清楚。（1）本研究以SD大鼠为实验对象，通过同时夹闭肠系膜上动脉和腹腔动脉，建立II/R肺损伤动物模型，探索肠缺血后再灌注早期肺组织p38 MAPK蛋白活化规律；（2）使用新型的第二代p38 MAPK抑制剂SB239063，观察不同剂量药物-效应关系；（3）特异性抑制p38 MAPK活化，观察动物II/R后肺组织NF-κB、炎性细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6和IL-10基因表达及蛋白水平，肺组织炎性损伤情况。以探索p38 MAPK信号通路活化在II/R肺损伤的作用及分子机制。

项目的背景：.肠缺血再灌注引起的急性肺损伤具有很高的发生率和死亡率。Tumor necrosis factor-α (TNF-α), iterleukin-1β (IL-1β), IL-6和IL-10在肠缺血再灌注引起的急性肺损伤整个发展过程中起着重要作用。但是，具体调节这种现象的机制不明。本实验的目的在于研究在肠缺血再灌注老鼠中干扰p38 MAPK是否能下调TNF-α，IL-1β和IL-6或者上调IL-10进一步保护肺免受肠缺血再灌注引起的急性损伤。.主要研究内容：.①以Sprague-Dawley (SD)大鼠为实验对象，通过同时夹闭肠系膜上动脉和腹腔动脉，建立肠缺血再灌注(II/R)肺损伤动物模型，检测肠缺血后再灌注不同时间点肺组织p38 MAPK蛋白活化水平及变化规律以及其在肺组织中的定位，以及炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的定位及表达情况；.②在II/R肺损伤实验动物，使用新型的、第二代p38 MAPK抑制剂SB239063，观察不同剂量的p38 MAPK抑制剂剂量-药物效应关系，选择合适的p38 MAPK抑制剂剂量，特异性抑制肺组织p38 MAPK活化；.③使用特异性p38 MAPK抑制剂，观察动物II/R后肺组织炎性损伤，肺功能变化情况，以及肺组织NF-κB，促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和抗炎性细胞因子IL-10基因转录及蛋白水平。.重要结果：.研究结果表明：肠缺血再灌注引起急性肺损伤，并导致p38 MAPK的活化，促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达的上升，抗炎细胞因子IL-10表达的下降；加入p38 MAPK选择性抑制剂SB239063(抑制p38 α and β的活化)后，促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达的下降，抗炎细胞因子IL-10表达的上升，肠缺血再灌注引起的急性肺损伤减轻。.关键数据及其科学意义：.加入p38 MAPK选择性抑制剂SB239063(抑制p38 α and β的活化)后，促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达的下降，抗炎细胞因子IL-10表达的上升，肠缺血再灌注引起的急性肺损伤减轻。这些结果表明，抑制p38 α and β的活化可能通过下调促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达，上调抗炎细胞因子IL-10的表达，从而缓解肠缺血再灌注引