银杏叶提取物防治COPD气道重塑及肺血管重塑的实验研究

chronic obstructive pulmonary disease（COPD）is a kind of chronic respiratory disease that dose severe harm to people's health.At present,the treatment can not effective inhibit the development of COPD.Recent studies on COPD shown that airway and vascular remodeling had appeared at early stage, which had relationgship with inflammatory response 、immune Response and protease-antiprotease imbalance,and airway and vascular remodeling could bereversed at early stages of COPD.ginkgo biloba extract have effect on anti-inflammation、relax bronchial smooth muscle.The COPD model is made with upgrade smoking and lipopolysaccharide.

慢性阻塞性肺疾病（COPD）是严重危害人民身体健康的慢性呼吸系统疾病。但现有的治疗方法不能有效逆转或阻抑COPD的进行性发展。近期研究表明COPD气道、肺血管重塑在疾病早期就己出现，早期的气道、肺血管重塑是具有一定的可逆性，与炎症反应、免疫应答、蛋白酶-抗蛋白酶失衡密切相关。中药银杏叶提取物具有抗炎、舒张支气管平滑肌功能，拮抗内皮生长因子、抗氧化、保护血管等作用。本研究通过建立COPD大鼠模型，检测银杏叶提取物干预后大鼠气道、肺泡、肺血管炎症反应及组织重塑等病理超微结构的改变，检测大鼠动脉血及肺泡灌洗液中C-反应蛋白、部分促炎细胞因子及T淋巴细胞亚群等含量，大鼠支气管肺组织中MMP-9及TIMP-1蛋白，比较红霉素组、地塞米松组及银杏叶提取物组的干预效果，探索银杏叶提取物对COPD气道、肺血管重塑作用及其机制，为防治COPD及肺动脉高压带来新思路，为银杏叶提取物防治COPD提供科学依据。

主要研究内容 本项目将大鼠随机分为正常对照组(A组)、COPD对照组(B组)、GBE早期干预组(C组)、GBE后期干预组(D组)、红霉素早期干预组（E组）、红霉素后期干预组（F）组。通过用烟熏、脂多糖（LPS）气道灌注、冷空气刺激的复合造模方法建立COPD大鼠模型，并且在造模早期及造模后用银杏叶提取物及红霉素进行干预。COPD造模及相关药物干预后用光学显微镜及电镜对各组大鼠进行下列病理检测：主要检测平均肺泡面积及标准肺泡数。选取膜性细支气管（直径750-1100μm），测量各组大鼠管壁厚度、管壁平滑肌厚度并计算比值，测量管壁面积、管腔（气道）面积并计算比值；重点检测管壁炎症细胞浸润情况。选取腺泡内肺动脉（直径<400 μm），测量血管平滑肌厚度、血管壁厚度并计算比值，测量血管壁面积、血管面积并计算比值，检测血管平滑肌增殖情况，重点检测血管壁炎症细胞浸润情况等。检测大鼠支气管肺组织中MMP-1、MMP-9及TIMP-1蛋白。COPD造模及相关药物干预后对各组大鼠动脉血及肺泡灌洗液进行下列生化指标检测：CRP、TNF-α、IL-1、IL-8、CD4+、CD8+及CD4+/ CD8+比值。将各组所获得的实验检测数据进行综合分析、统计学处理。重要结果 ①光学纤维镜的观测结果：B、C、D、E、F五组均有COPD特征性改变，但程度不同。与A组相比，COPD模型的B组大鼠体重明显减轻，肺泡病理可见肺泡大量融合，肺泡总数减少，单个肺泡面积增大，且周围有大量的炎症细胞浸润。肺细支气管可见平滑肌断裂、增生，支气管壁有大量炎症细胞浸润，支气管壁变薄。肺细小动脉病理可见平滑肌增生明显，几乎占据整个血管管壁，周围有大量炎症细胞浸润。与B组相比，C、D、E、F组总体上体重有所增加，肺泡扩张、肺泡融合及炎症细胞浸润现象均有所减轻。我们的结果说明GBE能在一定程度上减轻肺泡、小气道和小动脉周围的炎症反应和抑制肺泡、细小支气管和肺泡内小动脉的结构重塑以及抑制，而且能部分减轻COPD炎症造成的肌肉萎缩；其作用和红霉素基本一致。②电镜观测结果：解剖各组大鼠发现造模组两肺体积明显增大，夜色较暗且夹有点状苍白，外表粗糙，质地较硬，弹性较差，气管及支气管黏膜较红肿，管腔中可见有较多的黏性分泌物。治疗组情况较造模组改善。电镜下观察GBE干预组及红霉素干预组大鼠支气管纤毛排列较整齐，有少量脱失、紊乱；大鼠肺组