Claudin-4在子宫内膜恶性转化及子宫内膜癌治疗中的作用研究

紧密连接完整性的丢失与癌症的发生、发展密切相关。本项目拟探讨紧密连接的骨架蛋白claudin-4在子宫内膜癌病因及治疗中的作用：① 检测不同类型子宫内膜组织和细胞系中claudin-4的表达，分析正常子宫内膜和恶性子宫内膜及细胞系中claudin-4的表达，比较Ⅰ型和Ⅱ型恶性子宫内膜的表达差异；②通过RNA干扰和RNA转染技术确定claudin-4的表达对子宫内膜细胞侵袭力和转移力的影响；③ claudin-4是产气荚膜杆菌肠毒素（clostridium perfringens enterotoxin CPE）的受体，体外实验研究CPE对子宫内膜癌细胞的杀伤作用；④制作高表达claudin-4的子宫内膜癌动物模型，研究CPE对子宫内膜癌组织的杀伤作用。阐明上述问题对发现子宫内膜恶性转化的病因及子宫内膜癌的辅助治疗具有重要意义。

紧密连接是正常上皮细胞稳态的关键结构，紧密连接完整性的丢失与癌症的发生、发展密切相关。claudin是构成紧密连接结构、维持紧密连接功能所必须的一类骨架蛋白。本研究拟探讨紧密连接的骨架蛋白claudin-4在子宫内膜癌病因及治疗中的作用。.1.通过检测不同类型子宫内膜组织中claudin-4的表达，发现claudin-4在子宫内膜癌中的表达显著高于正常增殖期内膜、正常分泌期内膜、单纯增生性内膜和复杂增生性内膜，Ⅱ型子宫内膜癌组织中claudin-4的表达高于Ⅰ型子宫内膜癌组织。2.以高表达claudin-4的Ishikawa细胞系作为研究对象，干扰claudin-4的基因表达，通过对细胞增殖能力，细胞凋亡和细胞侵袭能力的测定，发现claudin-4能显著增强子宫内膜癌Ishikawa细胞系的恶性行为能力。3.制备子宫内膜癌动物模型，研究顺铂、紫杉醇对子宫内膜癌组织中claudin-4表达的影响。发现种植瘤体积与claudin-4的表达呈显著相关性。随种植瘤体积的缩小，claudin-4的表达显著降低。4.用孕激素刺激培养子宫内膜癌细胞Ishikawa，检测孕激素处理前后claudin-4表达的变化。发现孕激素可以抑制Ishikawa细胞的生长，其作用机制可能与claudin-4表达的降低及细胞凋亡有关。Ishikawa细胞膜表达的claudin-4整合入细胞内部可能与孕激素抑制Ishikawa细胞的生长有关。5.通过无细胞表达体系，少量合成了产气荚膜杆菌肠毒素（CPE）蛋白，试验发现CPE对Ishikawa细胞有显著杀伤作用。.通过上述研究，我们初步认为：claudin-4在子宫内膜的恶性转化过程中起重要作用，claudin-4可以增强子宫内膜癌细胞的恶性行为。claudin-4在孕激素治疗子宫内膜癌过程中起了一定的调控作用，claudin-4可以作为子宫内膜癌治疗疗效的监测指标。claudin-4的受体（产气荚膜杆菌肠毒素）可能是子宫内膜癌治疗的新靶点。 .研究成果：部分研究结果已在Int J Gynecol Cancer、Oncology Letters和中华妇产科杂志上发表。