N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶Ⅴ表达受阻导致内质网应激的研究

课题组用DNA芯片研究了N－乙酰葡萄糖基转移酶Ⅴ（GnTⅤ）反义cDNA转染的肝癌细胞时发现存在内质网应激，表现为伴侣蛋白基因表达上调，内质网相关的蛋白质降解途径基因表达上调，蛋白质合成系统的基因表达下调。用GnTⅤ反义寡核苷酸技术、RT-PCR及Western印迹检测内质网应激关键基因Bip和XBP1确证了GnTV表达受阻特异导致内质网应激。为探讨机制拟分析GnTⅤ表达与葡萄糖和氨基酸转运进细胞的关系；GnTⅤ表达与细胞内糖蛋白N糖链结构的关系；GnTⅤ表达与内质网中N糖链合成的关系；GnTV表达与细胞内糖蛋白稳定性的关系。GnTⅤ表达受阻导致的内质网应激国内外尚未见报导，课题有原创性。课题研究不仅对内质网应激研究的基础理论有贡献，并且对开发特异的GnTⅤ反义寡核苷酸技术诱导内质网应激及细胞凋亡，配合介入治疗肝癌提供理论基础。