“益肾填精”法促进SHR大鼠脑发育的DA神经网络机制研究

ADHD is a neurodevelopmental disorder, its core pathology more and more focus on the DA neurons network belongs brain regions dysfunction. In previous work, we confirmed "marrow growth retardation the" ADHD TCM Pathogenesis key "YSTJR" treatment of ADHD for good efficacy. This project is intended to ADHD classical model of juvenile SHR rats as the research object, puzzle rather God particle as a drug carrier, based on proof of behave test about hyperactivity and cognitive improvement, By the method of high performance liquid electrochemical, electron microscopy, in situ hybridization PCR experiments to detect treatment SHR rat frontal - striatal brain regions brain weight and volume; DA content; synaptic the ultrastructure and GDNFmRNA gene expression of 4 groups biochemical changes. Molecular mechanism study kidney from DA neurons network maturity fill fine treatment of ADHD, promote brain development, improve brain function. Provide further theoretical and experimental basis for the increase in pharmaceutical clinical efficacy of prevention and treatment of ADHD.

注意缺陷多动障碍属于发育行为障碍范畴，其核心病理机制越来越集中于DA能神经网络所属脑区功能障碍。我们在前期临床研究中证实“髓海发育迟缓”是ADHD的中医病机关键，并以“益肾填精”法治疗ADHD获效。本项目拟以ADHD经典模型—幼年SHR大鼠为研究对象，以益智宁神颗粒为药物载体，在行为学实验验证益肾填精法改善SHR大鼠多动行为和认知功能的基础上，通过高效液相电化学法、透射电镜技术、RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法等实验技术，检测SHR鼠大脑DA神经网络所属的额叶-纹状体脑区的发育，相应指标从宏观到微观分别是DA特定脑区的重量和体积、DA神经递质含量、DA神经突触超微结构和DA神经特异性营养因子GDNFmRNA及其蛋白表达等，目的是从DA神经网络成熟度方面研究益肾填精法促进SHR大鼠脑发育、改善其脑功能的机制，为提高中医药防治ADHD的临床疗效提供更深入的理论和实验依据。

注意缺陷多动障碍属于发育行为障碍范畴，其核心病理机制越来越集中于DA能神经网络所属脑区功能障碍。我们在前期临床研究中证实“髓海发育迟缓”是ADHD的中医病机关键，并以“益肾填精”为治疗法则组方“益智宁神颗粒”治疗ADHD获效。本项目正是基于这样的治疗理念和处方，结合ADHD的发病机制研究进展，从神经递质、突触超微结构和GDNFmRNA及蛋白表达等三个层次进行ADHD的DA神经网络机制研究。. 主要研究内容包括2个行为学实验和3个生物学实验，行为学实验分别是开场实验和Morris水迷宫实验，涉及DA能神经网络机制研究的实验分别是DA能神经递质生物合成的测定，DA能神经突触超微结构的检测，DA能神经网络所属脑区GDNFmRNA及蛋白表达的测定。. 行为学实验结果显示，益智宁神颗粒可以改善SHR大鼠冲动、多动行为及认知水平，疗效与托莫西汀及哌甲酯相似，远期疗效优于哌甲酯。. DA能神经网络机制系列实验研究结果显示：1、益智宁神颗粒能够提高SHR大鼠特定脑区DA含量、可以改善SHR大鼠纹状体及前额叶皮质DA突触超微结构、增加DA神经特异性营养因子GDNFmRNA及其蛋白表达，对促进幼龄SHR大鼠特定脑区多巴胺能神经网络成熟度具有一定作用。2、益智宁神颗粒可以双向调节SHR幼鼠大脑不同部位中DA含量，同时可以升高NE含量，纠正这两种神经递质的不平衡状态；可以减轻 SHR大鼠海马突触超微结构损伤程度，调控海马中GDNFmRNA及其蛋白表达。. 科学意义：1、本项目的研究，从DA神经递质含量、突触超微结构的形态学、其特异性营养因子GDNF的分子学变化等不同层次，不仅对DA神经网络所在的特定脑区—前额叶和纹状体进行了深入的机制探索，而且对海马、下丘脑等与认知功能相关的脑区也进行了这三个层次的探索，也为ADHD的认知功能基础研究积累了实验数据。2、本项目在开展中，在原设计的基础上增加了非中枢神经兴奋剂—托莫西汀对照组，横向对比了中药治疗与ADHD经典的中枢兴奋剂和国内外最新诊疗指南新增加的一线用药、非中枢兴奋剂—托莫西汀，使疗效比较及机制研究更具系统性和可比性，也更贴近最新诊疗进展和临床实际。