Leptin调控PPARγ/NF-κB参与IPF急性加重发病机制的研究

Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is a chronic progressive disease. Some patients may experience acute exacerbation (AE). These patients will be present rapid aggravation and died in a short period. The mechanism of AE-IPF is still unclear. The diffuse lung damage is the main clinical characteristics of AE-IPF. Leptin is a pro-inflammatory cytokine. It can mediate the inflammation reaction, promote the proliferation and apoptosis of epithelial cells and then lead to acute lung injury via regulating PPARγ/NF-κB signal pathway. We have demonstrated that there are more severe inflammation reaction and apoptosis of alveolar epithelial cells among both patients with AE-IPF and model mice of acute exacerbation pulmonary fibrosis compared with controls. Leptin expression was elevated in perepheral and lung tissues from AE-IPF patients. In lung tissues of model mice, the expression of Leptin and OB-Rb were increased, while PPARγ was decreased. Therefore, we supposed that Leptin may be involved in the development of AE-IPF by regulating PPARγ/NF-κB signaling. In our study, the NF-κB/p65 siRNA and the model mice treated by bleomycin and γHV68 herpesvirus will be used to explore the role and the related molecule mechanism of Leptin in acute exacerbation of IPF patients from cell and animal levels. It will provide the theoretical evidence of targeted therapy for these patients.

特发性肺纤维化（IPF）是一种慢性进展性疾病，部分患者可出现急性加重（AE），导致病情急剧恶化而死亡。AE-IPF病因未明，主要临床特征表现为弥漫性肺泡损伤。瘦素（Leptin）是一种促炎性细胞因子，可以通过PPARγ/NF-κB信号调控机体炎症反应，影响细胞增殖及凋亡，导致急性肺损伤。我们前期研究发现，AE-IPF患者和肺纤维化急性加重模型小鼠体内炎症反应及肺泡上皮细胞凋亡明显增加；肺纤维化急性加重患者及模型鼠均出现Leptin高表达、PPARγ低表达；因此推测Leptin可能通过PPARγ/NF-κB信号通道调控细胞凋亡及炎症反应参与AE-IPF发病。本课题拟采用NF-κB/p65 siRNA转染肺泡Ⅱ型上皮细胞及γHV6病毒诱导的博来霉素小鼠建立肺纤维化急性加重的动物模型，从细胞和动物水平探讨Leptin在IPF急性加重发病中的作用及分子机制，为寻求AE-IPF治疗新靶点提供理论。

特发性肺纤维化（IPF）是一种病因未明的慢性进展性疤痕性疾病，部分患者可出现急性加重（AE），导致病情急剧恶化而死亡。AE-IPF发病机制尚不明确，其主要临床影像学和病理组织学上特征表现为在原来普通型间质性肺炎（UIP）背景上出现弥漫性肺泡损伤（DAD）。瘦素（Leptin）是一种促炎性细胞因子，不仅可以促进肝脏、肾脏以及肺纤维化的形成，还可以通过PPARγ/NF-κB信号调控机体炎症反应，影响细胞增殖及凋亡，导致急性肺损伤的发生。.主要研究结果：.1. Leptin在AE-IPF患者外周血表达水平较正常对照和S-IPF患者明显升高，并且AE-IPF患者外周血Leptin表达水平可以预测AE-IPF的发生和生存时间。.2. 在AE-IPF患者肺组织，WB和QT-PCR结果显示，Leptin、OB-Rb、NF-κB及Bax表达较S-IPF和正常对照患者明显升高，而PPARγ和Bcl-2的表达明显降低。在人体肺组织标本中验证了Leptin可能通过PPARγ和Bcl-2的表达明显降低。在人体肺组织标本中验证了Leptin可能通过调控PPARγ/NF-κB信号通道，进而影响细胞凋亡参与AE-IPF的发病。.3．在AE-IPF患者BALF中，较S-IPF和正常对照患者相比，淋巴细胞明显升高。.4. 采用重组TGF-β1处理肺泡II型上皮细胞系A549，得到了肺纤维化的细胞模型，然后使用Leptin过表达的慢病毒感染A549细胞，观察细胞凋亡促凋亡分子Bax表达增加、抗凋亡分子Bcl-2表达降低，信号通道PPARγ表达下调、NF-κB/p65表达上调。结果说明Leptin可能通过PPARγ/NF-κB的信号通道，促进了肺泡II型上皮细胞的凋亡，进而促进肺纤维化急性加重的发生。.5. 动物实验，建立了博来霉素（BLM）诱导的肺纤维化小鼠模型，以及γHV68 病毒处理BLM小鼠获得了肺纤维化急性加重的小鼠模型.