抗炎及促炎症消退介质消退素E1改善急性肺损伤的效果及机制研究

当前急性肺损伤的治疗侧重于抑制炎症发生，但效果欠佳。促炎症消退在急性肺损伤的预后中亦起重要作用，本课题组依据消退素E1"抗炎和促进炎症消退"双向作用的特点，提出抗炎与促炎症消退兼顾治疗急性肺损伤的策略。课题组前期研究证明消退素E1治疗急性肺损伤鼠模型具有明显疗效，但其机制尚不清楚，本课题设计拟对其作用机制进行深入研究。TNF-α下游靶点：NF-κB是调控炎症反应的关键因子；蛋白激酶受体相互作用蛋白3(RIP3)是诱导细胞坏死的关键蛋白。我们提出消退素E1可能通过抑制TNF-α-NF-κB和TNF-α-RIP3通路达到抑制急性肺损伤炎症并促进炎症消退作用的假设。本课题拟通过增强或阻断消退素E1的作用，探讨消退素E1对TNF-α-NF-κB和TNF-α-RIP3通路的影响。通过细胞和动物实验，研究消退素E1在急性肺损伤中对肺组织细胞功能的影响，为改善急性肺损伤预后提供新的思路和实验理论依据。

本研究采用激光共聚焦、分子生物化学、流式细胞仪和液相色谱等手段，并运用在体和细胞水平的急性肺损伤模型研究消退素D1的抗炎和促炎症消退作用，我们发现：（1）在体动物急性肺损伤动物模型下，消退素D1能减轻动物整体的炎症反应，包括减轻肺组织病理损伤，降低肺泡灌洗液内促炎症反应炎症因子水平，减少中性粒细胞募集和并增加凋亡；（2）消退素D1通过上调HO-1表达，从而减轻氧化应激损伤，减少肺组织紧密连接蛋白的破坏，从而减轻肺水肿;（3）消退素D1能减轻因脂多糖引起的内皮细胞紧密连接蛋白ZO-1，occludin和F-actin的破坏，这一过程与NF-κb和ERK信号通路有关;（4）消退素D1减轻脂多糖诱导的人原代肺泡上皮细胞凋亡，具体机制为通过诱导AKT信号通路磷酸化从而抑制凋亡相关信号分子的表达；（5）消退素D1能减轻脂多糖诱导的人原代肺泡上皮二型细胞的炎症反应，这一作用与NF-κb信号通路有关；（6）发现了急性肺损伤动物模型下机体内源性的RvD1表达规律；（7）以“炎症消退理论”为指导思想，发现心脏手术中给予消炎镇痛药（帕瑞昔布）能有效降低体外循环引起的细胞因子IL-6和IL-8的水平，并能升高抗炎细胞因子IL-10 水平，同时观察到能有效降低心肌损伤酶谱ck-mb和cTnT的水平；（8）发现了RIP3信号通路参与的坏死过程与急性肺损伤相关：肺损伤越重RIP3表达量越高。上述结果综合证明了消退素D1具有抗炎和促炎症消退作用，可能是一个有效的控制急性肺损伤的治疗策略。