我国猪链球菌2型中毒性休克综合征分子致病机制的研究

猪链球菌是一种重要的新发传染病病原体，1998年和2005年在中国大规模暴发猪链球菌2型（SS2）疫情，呈现出血浆渗漏、多器官衰竭的链球菌中毒性休克综合征（STSS）临床特征，但其致病机制尚不清楚。初步研究发现STSS患者血清中肝素结合蛋白（HBP）水平明显高于脑膜炎患者和健康人，在此基础上建立SS2与人全血相互作用的体外模型，从猪链球菌胞壁蛋白和分泌蛋白中筛选刺激人全血释放HBP的刺激元，同时构建刺激元突变体，通过动物模型进一步鉴定HBP刺激元；对HBP刺激元的活性决定簇进行定位，通过人全基因组转录谱分析和细胞信号转导通路的抑制剂及RNA干涉技术，分析我国SS2刺激人全血释放HBP的信号通路，探讨我国SS2引发STSS的分子机制。

在1998年和2005年中国的两次猪链球菌的大规模爆发中，大部分的死亡病例都是由中毒性休克引起的。这种症状的典型临床表现为血管渗漏。在已知的报道中，肝素结合蛋白（HBP）是引起血管渗漏的主要原因。本研究的目的在于阐释由猪链球菌引起的HBP释放及血管渗漏的分子机制。研究中我们发现中国中毒性休克病人血清中的HBP水平明显高于正常人或脑膜炎病人。接下来我们发现由猪链球菌05ZYH33株分泌的猪溶素（SLY）是刺激中性粒细胞释放HBP和引起小鼠血管渗漏的主要原因。由SLY引起的HBP释放是由钙离子内流依赖的中性粒细胞的脱颗粒导致的。同时药理学的研究表明，SLY可以与中性粒细胞上的TLR4受体结合，激活p38 MAPK通路，导致5-脂加氧酶的合成并因而分泌白三烯B4。合成的白三烯B4可以再次激活PI3K通路并引起中性粒细胞HBP的释放。5-脂加氧酶的抑制剂齐留通（Zileuton）可以明显的降低SLY引起的HBP释放和小鼠的血管渗漏，进一步证实了5-脂加氧酶在SLY引起HBP释放过程中的关键作用。这些发现有助于猪链球菌引起的中毒性休克的潜在治疗位点的发现。