MicroRNA 在宫颈癌及癌前病变中的差异表达及在宫颈癌发展过程中的作用机制

宫颈癌是妇女最常见的妇科恶性肿瘤之一，宫颈癌的发生与高危型HPV感染有关，少数HPV感染者会发展为宫颈上皮内瘤样变（CIN）,即宫颈癌前病变，而部分CIN患者最终发展为宫颈癌，然而目前尚无方法能预测宫颈病变的发展结局。MicroRNA(miRNA)与多种肿瘤的发生存在着密切关系，在多种癌细胞中有miRNA的异常表达。本研究通过检测正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样变（CIN）及宫颈癌组织的miRNA的表达，找出差异表达的miRNA；通过生物信息学分析对应的靶基因及其功能，并检测靶基因在不同组织中的表达；通过对差异表达的miRNA的过度表达或抑制，检测miRNA对肿瘤细胞生物学功能的影响；同时检测不同病变宫颈组织HPV感染状况，及miRNA与HPV癌基因的关系，探讨miRNA在宫颈癌发展进程中的作用及分子机制；寻找一种能作为预测宫颈病变发展结局及宫颈癌发生的生物标记物, 指导临床个体化治疗。

宫颈癌是妇女最常见的妇科恶性肿瘤之一，它的发生与高危型HPV 感染有关，然而只有少数感染者会发展为宫颈上皮内瘤样变（CIN）,即宫颈癌前病变和宫颈癌，宿主的基因变异在宫颈癌的发展中也起了重要作用。MicroRNA(miRNA)与多种肿瘤的发生存在着密切关系。本研究探讨了miRNA在宫颈癌及癌前病变组织中的表达及与宫颈癌发生发展的关系。结果发现： 利用miRNA芯片筛查宫颈癌组织及宫颈癌前病变（包括高度鳞状上皮内病变（HSIL）及低度鳞状上皮内病变（LSIL）中差异表达的miRNA，发现在宫颈癌及HSIL中存在差异表达的miRNA，其中miR-218在宫颈癌组织中显示最明显的下调，miR-21显示了最明显的上调，部分差异表达的miRNA经过定时定量RT-PCR验证；2. 利用多重巢式PCR检测宫颈组织中高危型HPV（HPV-16, 18, 31, 45, 52, 58）感染状况，显示宫颈癌及HSIL中有较高的HPV感染率；3.通过转染miRNA mimics到宫颈癌Hela细胞中, 检测miR-218, miR-21, miR-31及miR-9过表达对宫颈癌细胞生物学功能的影响，结果显示miR-218能抑制宫颈癌细胞增殖及侵袭和迁移的能力,而 miR-21, miR-31及miR-9能促进宫颈癌细胞的生长和迁移能力；4. 通过对靶基因的检测及生物信息学分析,显示miR-218及miR-21预测的靶基因与肿瘤细胞的生长、凋亡、粘附和迁移等有关。这些结果证实了在宫颈癌及宫颈癌前病变中存在差异表达的miRNA, 这些miRNA可能作为癌基因或抑癌基因在宫颈癌的发生发展中起作用。