癌基因p28GANK对肝干细胞和肝癌前体细胞功能的调节及其对肝癌发生机制的影响

肝干细胞兼具干细胞、肝细胞和胆管上皮细胞的许多表型特点,具多向分化潜能，与肝脏再生、肿瘤干细胞转化及肿瘤形成密切相关。有关肿瘤性肝前体细胞的认识尚在起步阶段，其生物学特性和调控机制仍知之甚少。p28GANK是肝细胞癌中高表达的癌蛋白，它可促进Rb磷酸化和p53泛素化降解，加速细胞周期进程和抑制细胞凋亡，在肝癌早期发生发展中具有重要作用。前期工作中我们已发现卵圆细胞的活化与p28GANK存在着联系，并伴随着Rb和p53的降低。本项目将研究在正常和肿瘤性肝前体细胞活化过程中，p28GANK的表达情况；p28GANK自身对这些前体细胞活化、增殖、致瘤性、自我更新和耐药性等生物学功能的影响；借助转基因小鼠和其他动物模型，进一步研究p28GANK是否通过调节肝干细胞和肝癌前体细胞功能影响肝癌的发生发展，并探寻相关分子机制，深化认识肝癌干细胞与肝癌发生发展间的联系，为肝癌防治提供新的思路和靶标。

p28是有重要功能意义的癌蛋白，影响多种肿瘤的预后，但是它如何促进肝癌发生发展的作用机制仍未明了。本项目对该蛋白的功能深入研究后取得了如下新发现：.1.首先，我们发现p28能促进肝癌的侵袭和转移，可作为肝癌分子分型和预后判别指标，机理上与p28参与调控PI3K-AKT-HIF1α通路密切相关。成果发表在肝脏病杂志Hepatology（2011;53:181-192，IF：12.08）。.2.肿瘤起始细胞是影响肿瘤发生和复发转移的根源，但目前缺乏通用的标志分子是影响有关肿瘤起始细胞研究的瓶颈之一。我们进一步研究了p28对肝癌起始细胞干性功能的调控，发现p28影响肝癌发生和转移的机制与其增强并维持肿瘤干性密切相关，机制上表现为它可调节干细胞调控因子Oct4的泛素化降解，进而明确了p28是抗肝癌干细胞治疗的特异靶标。此部分成果发表在美国胃肠病学杂志Gastroenterology上（2012 Jun;142(7):1547-58. IF: 12.88）；论文发表同时，该杂志编辑部在同刊专门为p28一文配发了编者按，认为我组发现的癌蛋白p28联合肝癌干细胞标志物OV6可作为确定肝癌预后的独立指标；p28作为调控肝癌起始细胞的重要调控子，成为抗肿瘤起始细胞治疗肝癌的特异靶标。评述这一发现为靶向肝癌起始细胞的治疗愿景提供了新策略（Gastroenterology 2012 Jun;142(7): 1414-1416）。.3.还新发现p28对β-catenin通路存在正反馈调节作用（Cell Research. 2011 Aug;21(8):1248-61.IF：10.4）；并探讨了PYK2对肝癌复发转移的影响及机制（Ann. Surg. Oncol. 2012 May 23. IF: 4.2）。.4.我们进一步开展了以p28为靶点筛查肝癌治疗药物的应用研究，筛选到了一些特异性阻断分子间结合的小分子化合物，获得专利授权一项（ZL200810200785.1）；另外两项专利在实审中。.综上，项目期间发表了SCI论文6篇，影响因子10以上的3篇。申请发明专利3项（含国际专利1项），授权一项。另获得2013年国科金面上项目1项，为本研究的后续深入提供了保障。简之，本项目的实施完成了既定任务，确认了p28在肝脏肿瘤起始细胞中的意义及靶向治疗价值和前景，为进一步的肿瘤诊断和治疗奠定了基础。