Insig-1介导的SAK突变体调控脂肪代谢机制研究

葡激酶是一种具有溶解血栓功能的蛋白，可以通过激活纤溶酶原降解纤维蛋白。我们构建的葡激酶突变体是通过修饰野生型葡激酶抗原表位获得的低免疫原性葡激酶。在动物实验中发现葡激酶突变体能明显改善高脂饮食喂养大鼠肝脏脂肪沉积，可以降低大鼠TG，TC和LDL水平，抑制动脉粥样硬化过程中泡沫细胞的形成和血管壁损伤，同时在高脂喂养家兔和载脂蛋白E缺陷小鼠中也观察到同样变化。基因芯片，蛋白双向电泳及RT-PCR的结果显示葡激酶可上调Insig-1的水平，Insig-1蛋白可通过调控核转录因子SREBP调节脂肪代谢相关基因表达，结果提示Insig-1参与介导了葡激酶突变体调节肝脏脂肪代谢的功能。本研究在确定葡激酶突变体通过Insig-1调节脂肪代谢的研究基础上，进一步探讨了葡激酶突变体调控Insig-1表达的分子机制，为深入了解脂代谢调控网络，发现新的调控靶点奠定基础，也为新型治疗药物的研究奠定了基础。

葡激酶是一种具有溶解血栓功能的蛋白，可以通过激活纤溶酶原降解纤维蛋白。我们构建的葡激酶突变体（SRH）是通过修饰野生型葡激酶抗原表位获得的低免疫原性葡激酶，同时在以其为骨架融合了水蛭素12肽与RGD序列。在动物实验中发现SRH能明显改善高脂饮食喂养大鼠肝脏脂肪沉积，可以降低大鼠TG，TC和LDL水平，同时在高脂喂养家兔，载脂蛋白E缺陷小鼠及高脂喂养鹌鹑中也观察到同样变化。基因芯片筛选结果显示SRH可上调Insig-1水平，抑制apoA4表达水平，rt-PCR结果进一步证实SRH可以直接调控insig-1及apoA4的表达。以上结果证实Insig-1及apoA4均参与介导了葡激酶突变体调节肝脏脂肪代谢的功能。进一步的研究显示SRH蛋白还可以抑制动脉粥样硬化斑块的形成，抑制动脉粥样硬化发展中机体的炎性水平。在细胞及分子水平的研究显示这种作用是通过抑制凝血酶介导的致炎性作用产生的。凝血酶本是作为调控凝血系统的关键酶，对其炎性作用研究日益受到国内外关注。本研究显示SRH蛋白可以抑制凝血酶介导的炎性因子表达及血管内皮损伤，并进一步在动物体内证实了在机体内SRH仍然可以抑制凝血酶的这种作用。这种作用也是其抑制动脉粥样硬化的机制之一。本研究在确定SRH通过Insig-1调节脂肪代谢的研究基础上，进一步探讨了SRH调控脂肪代谢的分子机制，同时深入研究了SRH抗动脉粥样硬化作用的机制，研究结果显示SRH蛋白具有溶栓，抗凝，抗炎及调控脂肪代谢的作用，SRH正式从以上多个方面发挥了其抗动脉粥样硬化的作用。本研究为深入了解脂代谢调控网络，发现新的调控靶点奠定基础，也为新型动脉粥样硬化治疗药物的研究奠定了基础。