胆管细胞老化和间质表型转变在移植肝胆管病发病机制的研究

移植肝胆管病是指因缺血再灌注、免疫或炎症等因素引起的弥漫性或局灶性移植肝的胆管树狭窄/扩张、毁损/减少或消失、管型/胆石形成等，胆管上皮细胞的损伤和病理性修复愈合是其发病基础。本研究针对移植肝胆管细胞老化和上皮-间质表型转变(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)关键的病理生理环节，揭示细胞膜脂质微区域-胞膜窖/脂筏(caveolae/raft)在胆管细胞EMT和老化时信号传导通路的分子机理；评价骨形态形成蛋白7(BMP-7)的间质-上皮转化(mesenchymal-to-epithelial transition,MET)作用逆转胆管细胞EMT、减少移植肝胆管纤维化和狭窄的可行性。为临床设计移植肝胆管病的系统化防治方案提供理论基础和实验依据；并可为原发性胆汁性肝硬变、原发性硬化性胆管炎等其它胆管病的临床治疗提供新的思路，具有较好的临床应用前景。

移植肝胆管病是指因缺血再灌注、免疫或炎症等因素引起的弥漫性或局灶性移植肝的胆管树狭窄/扩张、毁损/减少或消失、管型/胆石形成等，胆管上皮细胞的损伤和病理性修复愈合是其发病基础。本研究通过临床移植肝胆管病的标本检测，分离大鼠及人肝胆管上皮细胞(BECs)并进行原代培养、检测TGF-β诱导后上皮-间质表型转变(EMT)，并在重建肝动脉的大鼠肝移植模型上研究长时间冷保存下胆管上皮细胞的EMT现象。结果发现：⑴临床移植肝胆管病的标本检测提示汇管区炎症细胞浸润，部分动脉分支闭塞，胆管消失、被炎细胞及纤维细胞代替；⑵体外培养的BECs在TGF-β诱导下发生EMT改变，转变成肌纤维母细胞，可能在胆管上皮纤维性改建、导致胆管狭窄和纤维化中发挥作用；⑶体外实验证明骨形态形成蛋白-7(BMP-7)可以逆转TGF-β诱导的BECs发生EMT；⑷重建肝动脉的大鼠原位肝移植模型中发现长时间冷保存可诱导BECs发生部分EMT改变，其上皮标记CK19, E-cad等表达下降，而间叶组织标记Vimentin、S-100、α-SMA、 TGF-β等表达增加，超声瞬时弹性检测提示移植肝硬度增加。本研究结果初步阐明了EMT在移植肝胆管病发病机制中的作用，为临床设计移植肝胆管病的系统化防治方案提供了理论基础和实验依据；并可为原发性胆汁性肝硬变、原发性硬化性胆管炎等其它胆管病的临床治疗提供新的思路。