基于聚酮合酶合成基因建立抗真菌化合物的筛选新模型

创新农药的关键是高效快速发现具有生物活性的新化合物，这是新农药开发的前提，也是影响新农药研发周期的决定性因素。由微生物产生的聚酮类化合物是由简单羧酸在聚酮合酶（PKS）的作用下连续脱羧缩合而成，是天然化合物的一个大家族，比例居已知六大类天然化合物之首，包括大环内酯类、四环类、蒽环类、聚醚类等抗生素，它们几乎均由放线菌产生。PKS是催化聚酮类化合物主链延伸的关键酶系，通常由几个多功能酶组成。本项目根据其中的酮基合酶（KS）的氨基酸同源性设计简并引物，首先利用改良的菌落PCR技术从多年保藏的大量放线菌中快速筛选携带KS基因的菌株，然后利用96孔深孔板进行高通量发酵，筛选出抗真菌活性的菌株。最后利用简并引物从具有活性的菌株中扩增出KS基因片段并进行测序及解析，筛选出新的KS基因。进而对含有新KS基因的菌株产生的聚酮类化合物进行分离纯化等研究。此模型的建立将为加速开发微生物源农药提供新方法。