微生物胁迫下东北林蛙皮肤活性肽选择性表达的研究

从无脊椎到脊椎动物在进化中形成了以抗微生物活性肽为重要组成的先天免疫机制，从无脊椎动物的研究中可以看出，在不同微生物胁迫下可使机体引发活性肽的选择性表达。两栖类是活性肽最丰富的脊椎动物，其抗菌肽的表达是否也呈现选择性表达的趋势尚不清楚，而这一问题直接关系到动物的适应对策和进化规律，也直接影响抗菌肽的有效分离、筛选和开发利用。我们在前期工作基础上，拟用几种不同类别微生物攻击东北林蛙，用RT-HPLC分析皮肤活性肽谱特异性变化；提取皮肤RNA，用RQ-PCR分析特定活性肽基因在不同微生物刺激下的表达；利用表达载体pPIC9K合成特异性活性肽，分析特异性活性肽及其组合对微生物的抑杀能力，揭示东北林蛙皮肤活性肽在基因转录及蛋白水平上选择性表达的规律，为深入理解先天免疫的组成方式、机制、进化规律及建立新药筛选模式提供理论基础。