幽门螺杆菌所致胃组织炎症恶性转化过程中“节点miRNA”分子的鉴定、分子机制及表达调控研究

幽门螺杆菌感染所致慢性胃炎与胃癌的发生有着密切的联系，我们已通过miRNA表达芯片分析了处于不同炎症/癌症病理阶段的4组胃粘膜组织样本中差异表达的miRNA，并通过Northern验证了4个表达明显变化的miRNA（miR-205、129、 29b和125b），相同组织中平行进行的甲基化芯片分析获得了miRNA基因启动子区的甲基化状态改变情况。本项目将通过寡核苷酸转染和慢病毒介导的基因转移，分别在细胞系和动物模型中研究这4个miRNA在胃炎恶性转化过程中的功能和分子机制，并重点考察它们与已知炎症通路IL-6、IL-10和TGF-β等的相互作用关系；揭示它们自身表达异常的调节因素（包括表观遗传水平和炎症通路的调控）；鉴定更多慢性胃炎恶性转化相关miRNA；实验外源干预上述miRNA表达用于胃癌抗炎治疗的可行性，为从miRNA层面丰富和完善胃炎恶性转化调控网络以及发展胃癌治疗的新方法奠定基础。

胃癌居中国人群男性恶性肿瘤发病第二位，死亡率高，严重影响中国人群健康。大量的临床调查数据和动物模型实验证实H-plyori感染所致慢性胃炎与胃癌的发生有着密切的关系，60%以上的胃癌患者伴有H.pylori幽门螺杆菌感染，已明确H.pylori感染是胃癌的始发因素之一，但目前对炎症在胃癌发生过程中的详细机制尚未完全揭示。MicroRNA（miRNA）是非编码RNA中研究最为深入，作用机制相对明确的一大类调控分子，虽然已有很多证据表明miRNA在免疫、炎症和肿瘤这些关系紧密的生物学领域具有重要的功能作用，但对其参与炎症诱发肿瘤发生的分子机制仍了解较少，特别是对于H.plyori感染所致慢性胃炎的恶性转化过程中miRNA的功能和分子机制仍较少有人研究。在该重大研究计划的资助下，我们收集了来自北京、山西等不同医院的共约200例胃癌及其癌旁组织标本，并根据临床病理学资料和Hp感染做了分类。在约200例胃癌及其癌旁组织标本中考察了大量miRNA分子的表达情况，鉴定到若干个在胃癌组织中低表达的miRNA分子，并发现其中多个miRNA分子在癌组织中的低表达与Hp感染诱发胃癌密切相关，进一步通过体外培养的胃癌细胞系及体内成瘤实验明确了miR-29a, b, c, miR-125b，miR-205, miR-219-2-3p, miR-10在Hp感染诱发胃癌过程中的抑癌功能及具体机理，同时确定了miR-125b，miR-205, miR-219-2-3p, miR-10启动子区甲基化水平的上调是其自身在胃癌发生过程中发生改变的主要原因。另外我们还发现miR-29家族在经化疗药物处理的胃癌细胞系中急剧上升，显著影响化疗药物抑制肿瘤生长的效果，提示化疗药物通过激活一系列肿瘤抑制型miRNA(ts-miRs)的表达发挥其治疗效果，这可能是化疗药物治疗胃癌的一种普遍机制。