间充质干细胞介导TGF-β诱导小移植肝局部免疫耐受的研究

相比全肝移植，小肝移植呈现相对快速和加剧的免疫排斥反应。诱导受体移植肝局部稳定的免疫耐受是解决小肝移植排斥的理想措施。T调节细胞（Treg）是诱导此类免疫耐受的强大执行者。诱生型Treg（iTreg）可以弥补自然型Treg（nTreg）的缺陷，更有应用前景和价值。TGF-β是生成iTreg的关键因子，申请者已用其在体外成功诱导iTreg；另外间充质干细胞（MSCs）有向受损组织趋化迁移，易于携带外源基因的特性。本研究以MSCs为载体将TGF-β基因靶向带入损伤的小移植肝内，诱导小移植肝局部生成更多iTreg，克服以往体外扩增、体内回输和全身使用Treg的毒副作用；同时利用TGF-β和MSCs自身具有的多途径免疫抑制作用以及TGF-β、MSCs、Treg的网络化的相互作用，保护同种异体小肝移植大鼠免于排斥反应，探讨其机制，为iTreg在诱导小肝移植免疫耐受的临床应用提供实验依据。

在国家自然基金的资助下，对照标书的研究内容，我们系统地研究了TGF/MSCs诱导小肝移植免疫耐受的作用及其机制。首先，建立过表达转化生长因子-β（TGF-β）的骨髓间充质干细胞（MSCs），得到高表达TGF-β的MSCs，命名为TGF/MSCs，并研究TGF/MSCs在体外抑制T细胞增殖、诱导Tregs生成等促进免疫耐受方面的作用；其次，建立大鼠30%体积肝移植急性排斥模型，门静脉回输TGF/MSCs，利用MSCs易于携带外源基因，向受损组织趋化迁移等特性，将TGF-β基因靶向带入损伤的小移植肝内。我们发现，TGF-β和MSCs自身具有的多途径免疫抑制作用，能延迟大鼠小体积肝移植急性排斥的发生、减轻其程度；而TGF/MSCs能进一步扩大这方面的效应，小肝移植受体长期存活。这种保护性效应与TGF/MSCs中TGF-β、MSCs、Treg间网络化的相互作用有关，除了TGF-β和MSCs各自的免疫抑制效应，TGF/MSCs诱导小移植肝局部生成更多iTreg，克服以往体外扩增、体内回输和全身使用Treg的毒副作用，保护同种异体小肝移植大鼠免于排斥反应。总而言之，本研究为iTreg在诱导小肝移植免疫耐受的临床应用提供实验依据。