以脂肪间充质干细胞为基础的丝素蛋白支架促进巨噬细胞极化及预防宫腔粘连的机制研究

Intrauterine adhesion usually occurs to child-bearing age females, following intrauterine procedures, which might result in infertility and recurrent abortions, and overburdens both the individuals and society，and might be caused by the curettage related absence of endometrial stem cells，and inflammation. Macrophage is essential for inflammation regulation and fibrosis prevention，however，it has not been well researched in the area of intrauterine adhesion. In the former studies on pelvic floor dysfunction, by implanting the adipose-derived stem cells onto the silk fibroin scaffold, the applicant and the research team has proved its nice biocompatibility, and the ability of promoting tissue regeneration，regulating macrophage as well. Therefore, in the present study, we aim to implant the adipose derived stem cells onto the silk fibroin scaffold following the intrauterine procedure in order to find out its regulation in macrophage regulation，preventing the formation of intrauterine adhesion, as well as to study its environment regulating mechanism in stimulating the proliferation and differentiation of endometrial cells and endometrial stem cells，in order to explore new therapy for intrauterine adhesion and prevention.

宫腔粘连多发生于育龄女性，在宫腔操作后出现，可造成不孕或复发性流产，为家庭和社会造成了沉重的医疗负担，究其原因与子宫内膜损伤、间充质干细胞缺失及炎症反应相关，而巨噬细胞极化在炎症反应调控、预防组织纤维化中起重要作用，在宫腔粘连领域的作用却不明确。申请人在前期盆底的研究中将脂肪来源的间充质干细胞种植到丝素支架后应用到盆底治疗中，结果初步表明其生物相容性良好，并对巨噬细胞有一定的作用。在此基础上，本课题拟将载有脂肪来源间充质干细胞的丝素支架应用于子宫内膜损伤模型中，不仅为局部组织补充提供干细胞，而且研究其对巨噬细胞极化的调节，及对子宫内膜再生的促进作用及对宫腔粘连的预防作用，并探讨其对局部微环境的调节机制，为宫腔粘连的预防及治疗提供新途径。

本项目拟将脂肪来源间充质干细胞种植到丝素微球上，并验证其对子宫内膜急性损伤后的修复作用及对巨噬细胞极化的影响，前期工作中已将大鼠脂肪来源间充质干细胞种植到丝素支架上，过程中发现，细胞可在支架上粘附生长，死亡的细胞丧失粘附能力从支架上脱落，但在此过程中，支架上粘附细胞的量、分泌细胞因子的量难以控制，无法量化，导致有可能对后续实验结果造成较大的误差，且相较某一种或某几种细胞因子，干细胞可通过旁分泌机制分泌多种细胞因子起作用。外泌体具有生物相容性及免疫惰性，易于保存，可量化，另外泌体可以解决异体使用的问题。故而，本项目中将观察干细胞对子宫内膜细胞损伤的直接作用及机制调整至外泌体的提取并研究其对子宫内膜损伤修复的作用及机制，一定程度上避免了提取干细胞、取材造成的自体组织损伤，并发现干细胞外泌体通过EGFR/PI3K/AKT/mTOR通路抑制损伤后子宫内膜细胞的凋亡，有望进一步应用至临床；另外本项目进一步评估了与子宫内膜损伤修复及子宫内膜癌相关的免疫相关基因，进行基因功能富集分析，有利于进一步开展相关免疫调控研究。