抗SP1抗体在原发性干燥综合征发病中的作用及其分子机制研究

Primary Sjögren’s syndrome (pSS) is a chronic systemic autoimmune disease, in which T, B lymphocytes are abnormally activated and lots of autoantibodies are produced. Now there lack serum biomarkers with high specificity in the early stage of pSS. Previous study has screened a novel antibody - anti-salivary gland protein 1 (SP1) antibody from the IL-14α-transgenic pSS animal model, and the antibody has been shown to be meaningful both in pSS animal models as well as patients. The mechanism may be related to the exposure of SP1 antigen, followed by its abnormal activation of autoimmune T, B lymphocytes. We discovered that SP1 antigen is pathogenic in the development of pSS in our previous research, however, its specific antigen epitopes still remain unknown. This project will clarify the diagnostic value of anti-SP1 antibody in early pSS, screen and identify the specific epitopes, synthesize polypeptides, and immunize mice to establish pSS animal model to reveal the pathogenesis of anti-SP1 antibody through different aspects of patients, cell, molecule and animals.

原发性干燥综合征（pSS）是一种累及全身多脏器的慢性隐匿性自身免疫疾病，其发病机制主要涉及T、B淋巴细胞的异常活跃及由此产生的多种自身抗体。目前pSS尚缺乏有诊断特异性的早期血清标志物。前期研究在IL-14α转基因pSS动物模型中筛选得到了一种新抗体——抗salivary gland protein 1（SP1）抗体，并证明其对于早期pSS动物模型及患者具有一定提示价值，机制可能与唾液腺上皮局部抗原暴露后SP1蛋白对自身免疫性T、B细胞的异常活化有关。本课题组在人体及动物实验中初步发现SP1蛋白在pSS的发病中具有致病性，但其具体特异性抗原表位及致病机制尚不明确。本课题组将在前期研究基础上，通过病人、细胞、分子及动物四个层面，系统阐明抗SP1抗体在早期pSS中的诊断意义，筛选并鉴定SP1蛋白特异性抗原表位，合成特异性多肽，并通过抗原诱导小鼠模型，深入探讨抗SP1抗体产生和作用的免疫学机制。

原发性干燥综合征(pSS)是一种累及全身多脏器的慢性隐匿性自身免疫疾病,其发病机制主要涉及T、B淋巴细胞的异常活跃及由此产生的多种自身抗体。目前pSS尚缺乏有诊断特异性的早期血清标志物。前期研究在pSS动物模型中筛选得到了一种新抗体——抗 salivary gland protein 1(SP1)抗体,并证明其对于早期pSS动物模型及患者具有一定提示价值,机制可能与唾液腺上皮局部抗原暴露后SP1蛋白对自身免疫性T、B细胞的异常活化有关。本项目在前期研究基础上,通过病人、细胞、分子及动物四个层面, 以干燥综合征患者和小鼠 pSS 动物模型的外周血、唾液及组织标本为对象,通过体外及体内实验，（1）明确了抗 SP1 抗体在 pSS 早期诊断中的意义和影响因素：SS患者血清和唾液中抗SP1抗体水平高于健康对照，血清抗SP1阳性率在抗SSA阴性患者中明显升高，有助于提高干燥综合征诊断率，且在病程早期意义更显著，有利于疾病的早期诊断。抗SP1抗体水平与抗α胞衬蛋白抗体水平呈正相关。（2）完成了SP1的组织病理学染色，明确了在SS患者唇腺和SS小鼠唾液腺中，SP1抗原主要分布在导管上皮细胞中，证实了SP1抗原暴露在SS发病中的致病意义。（3）筛选并鉴定SP1 抗原的特异性表位，合成了特异性多肽，并验证了其在体外细胞实验中对自身免疫性 T、B 细胞具有活化作用，促进了细胞的增殖；（4）通过SP1抗原成功诱导小鼠出现了SS的临床表型和免疫学、病理特点，证实了 SP1 蛋白在体内致病的作用，其刺激T、B细胞产生自身抗体，并造成T、B细胞平衡紊乱，从而诱导疾病的发生。综上，本课题系统阐明了抗SP1抗体在干燥综合征发病中的作用及其分子机制，具有临床应用价值及理论意义。该课题共发表论文7篇，其中SCI论文4篇，核心期刊论文3篇，项目的成果在6次国内外学术会议上进行交流，其中全国学术会议发言2次，国际学术会议壁报展示4次。