构建NOG鼠模型研究CTCL肿瘤细胞的侵袭性

皮肤T细胞淋巴瘤（cutaneous T cell lymphoma, CTCL）是一原发于皮肤并可累及外周血和内脏各器官的复杂恶性肿瘤。由成熟的记忆性、恶性T细胞克隆增生构成，其发病机理不明。临床上以表达CD4+辅助性T细胞为主的和以CD8+细胞毒性T细胞为主的不同免疫表型的CTCL最为常见。目前，在活体水平上尚无合适手段来研究不同免疫表型CTCL肿瘤细胞的侵袭性、器官转移能力和估计预后；在临床上患者对治疗的反应存在很大差异，至今尚无合理的治疗方案。鉴于此，本研究拟首次构建CTCL肿瘤细胞的NOG鼠原位移植模型来探索基于CD4+T细胞和CD8+T细胞两种不同免疫表型的CTCL在活体内的生物学行为，包括CTCL肿瘤细胞的致瘤能力、侵袭性和预后上的差异，为临床上制定合理的治疗方案提供可靠的实验科学依据。

本研究构建了人类皮肤T细胞淋巴瘤细胞株的鼠模型并将肿瘤子代稳定地在该鼠模型中接种，为进一步研究肿瘤细胞本身的特性以及微环境和治疗对于肿瘤细胞的影响搭建了一个有力的平台。利用该肿瘤鼠模型，我们研究了化疗对肿瘤生长、侵袭性和凋亡的影响，为揭示临床上皮肤T细胞淋巴瘤化疗后复发和疾病进展、侵袭性增加的机制。我们发现大剂量和小剂量化疗均不能抑制肿瘤的生长，反而缩短了动物的生存期。究其原因，我们在体外和体内实验中发现化疗造成肿瘤组织的缺氧，从而上调抗缺氧分子HIF-1α和增加糖酵解反应，诱导T细胞来源的皮肤T细胞淋巴瘤细胞株分泌IL-17F以及一系列与IL-17产生有关的炎症因子（IL-6，MMP9,VEGF）、转录因子(STAT3)、趋化因子(CCR6)的升高，同时HIF-1α通过调节NOTCH通路使肿瘤细胞高表达Bcl-2，导致肿瘤细胞抗凋亡；而抑制HIF-1α则减少了IL-17F产生和BCL-2的表达；通过给荷瘤小鼠注射HIF-1α抑制剂，发现肿瘤细胞生长减慢。因此，本研究揭示了化疗会造成缺氧环境使得HIF-1α高表达，从而使皮肤T细胞淋巴瘤T细胞的糖酵解过程增加，从而表现IL-17F表型以及诱发相关的炎症分子的增加，造成组织的炎症反应加重；并通过HIF-1α-NOTCH-Bcl-2通路导致肿瘤细胞抗凋亡能力增加；而HIF-1α抑制剂可以逆转以上结果。通过以上实验结果，我们揭示了化疗后通过影响T细胞的代谢途径，导致微环境的变化致使皮肤T细胞淋巴瘤产生炎症因子和凋亡能力改变，是皮肤T细胞淋巴瘤化疗后短期内复发、疾病快速进展的机理之一，为今后通过针对抑制HIF-1α治疗皮肤T细胞淋巴瘤提供了靶向治疗的方向。